Long-Taq DNA聚合酶
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检测试剂盒
- 牛Elisa试剂盒
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- 猪检测试剂盒/Porcine
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 500U
本产品由在普通Taq DNA聚合酶进行基因工程优化的快速DNA聚合酶基础商制成的混合酶,配以专为长片段PCR优化的反应缓冲液,特别适合对长片段的扩增。LF-Taq 扩增性能优异, 能在短时间内完成高效的PCR扩增.用普通Taq DNA聚合酶的进行PCR反应延伸时间一般为1kb/min,快速DNA聚合酶为1kb/10-15 sec,进行8kb产物的PCR反应可在1小时内完成. LF-Taq对简单模板的扩增可达40kb,对复杂模板的扩增也可达20kb.本制品使用生产工艺生产,经过两次过柱纯化,纯化>98%,完全去除外源蛋白和核酸污染。其特点如下:1. 为长片段扩增特别优化,使用常规PCR Buffer即可扩增8-10kb,使用超长Buffer扩增长度可达20-40kb。2.反应速度快,聚合速度高达10-15sec/kb,可为科研人员节约多达70%的实验时间。3.扩增效率高,同等条件下产量远高于普通Taq酶,在扩增片段时优势尤其明显。4.比活性高,分子量小于普通Taq酶。在相同酶量下有更高的酶活性。5.低背景,显著减少非特异性条带和引物二聚体。6.高稳定性,耐热性能,Long-Taq酶的T1/2=2.5-3 hour(100℃),12 hour(95℃),普通Taq酶的T1/2=1.6 hour(95℃),特别适合对高GC含量的模板的扩增。
1.感受态的制备
(1)LONG-TAQ DNA聚合酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)LONG-TAQ DNA聚合酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
LONG-TAQ DNA聚合酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,LONG-TAQ DNA聚合酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZP103-3质粒中量提取试剂盒200TZOMANBIO
ZP104-1高纯度质粒中量提取试剂盒50TZOMANBIO
ZP104-2高纯度质粒中量提取试剂盒100TZOMANBIO
ZP104-3高纯度质粒中量提取试剂盒200TZOMANBIO
ZP105-1质粒大量提取试剂盒5TZOMANBIO
ZP105-2质粒大量提取试剂盒10TZOMANBIO
ZP105-3质粒大量提取试剂盒20TZOMANBIO
ZP106-1高纯度质粒大量提取试剂盒5TZOMANBIO
ZP106-2高纯度质粒大量提取试剂盒10TZOMANBIO
ZP106-3高纯度质粒大量提取试剂盒20T