Furin 蛋白酶
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检测试剂盒
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抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 50U
Furin 蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶,定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括:凝血因子,血清蛋白和生长因子受体(如:胰岛素样生长因子受体) 。*短的切割识别位点是:Arg-X-X-Arg。然而,该酶倾向作用于 Arg-X-(Lys/Arg)-Arg位点。在 P6 位置的额外精氨酸似乎能增强切割效率。Furin 活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精氨酸化合物抑制。本产品浓度为2000U/mL。
1.感受态的制备
(1)FURIN 蛋白酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)FURIN 蛋白酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
FURIN 蛋白酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,FURIN 蛋白酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZS312-20.5M DTT10mlZOMANBIO
ZS31310% SDS50mlZOMANBIO
ZS314TEMED5mlZOMANBIO
ZS3151M Tris-HCl,pH6.850mlZOMANBIO
ZS3161.5M Tris-HCl,pH8.8100mlZOMANBIO
ZS401Western转膜缓冲液 (20x)100mlZOMANBIO
ZS402Western一/二抗稀释液100mlZOMANBIO
ZS403Western封闭液(BSA型)100mlZOMANBIO
ZS404Western洗涤液250mlZOMANBIO
ZS405Western一抗二抗去除液250mlZOMANBIO
ZS406BCIP工作液 50mg/ml100ulZOMANBIO
ZS407NBT工作液 50mg/ml100ulZOMANBIO
ZS40810% Sodium Azide (叠氮钠)100mlZOMANBIO