核糖核酸酶RNase If
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细胞系
分子生物学
生化试剂
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详细内容
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 10000U
核糖核酸酶 If (RNase If) 是一种单链特异性RNA 外切酶,能够切割所有RNA 二核苷酸键,产生 5' 羟基和 2',3' 环状单核苷酸。重组 RNase If 是大肠杆菌 RNase I 与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白,与野生型 RNase I 具有相同活性。具有下列特点1. 从DNA和蛋白质准备过程中去除RNA2. 降解单链 RNA 生成单、二、或三核苷酸)3. 用于核糖核酸酶保护试验4. RNase I 不能降解 DNA。降解单链 RNA 的能力比双链 RNA 的能力强。5. 无核酸内、外切酶污染。
1.感受态的制备
(1)核糖核酸酶RNASE IF接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)核糖核酸酶RNASE IF加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
核糖核酸酶RNASE IF载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,核糖核酸酶RNASE IF在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZI229-1羊抗人IgM(μ链特异)0.5mlZOMANBIO
ZI230-1羊抗人C30.5mlZOMANBIO
ZI231-1羊抗人白蛋白0.5mlZOMANBIO
ZI232-1羊抗人纤维蛋白原0.5mlZOMANBIO
ZI233-1羊抗人血清0.5mlZOMANBIO
ZI234-1羊抗小鼠IgG0.5mlZOMANBIO
ZI235-1羊抗小鼠IgG-F(ab)20.5mlZOMANBIO
ZI236-1羊抗猪IgG0.5mlZOMANBIO
ZI237-1羊抗牛IgG0.5mlZOMANBIO
ZI238-1羊抗鸡IgG0.5mlZOMANBIO
ZI239-1羊抗大鼠IgG0.5mlZOMANBIO
ZI240-1羊抗BSA0.5mlZOMANBIO