人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶

 数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 1000U
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1（Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I），也称为 HAP 1 或 Ref-1，与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5＇ 端的磷酸二酯键，产生单链 DNA 断裂，留下3＇ 羟基和 5＇ 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外，据报道 APE1 还具有弱的 DNA 3＇ 二酯酶、3＇ 到 5＇ 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性外，APE 1 还能通过一种氧化还原机制，体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。作为这个功能的一部分，APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。具体有下列特点：1. 单细胞凝胶电泳（彗星试验），彗星试验的推荐稀释倍数1:103 。2. 碱洗脱3. 碱解旋4. 改良切刻翻译

1．感受态的制备

（1）人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 ZI311-2羊抗人纤维蛋白原-FITC1mlZOMANBIO

ZI312-1羊抗人白蛋白-RBITC0.5mlZOMANBIO

ZI312-2羊抗人白蛋白-RBITC1mlZOMANBIO

ZI313-1羊抗人IgG、A、M-FITC0.5mlZOMANBIO

ZI313-2羊抗人IgG、A、M-FITC1mlZOMANBIO

ZI314-1羊抗人IgG、A、M-RBITC0.5mlZOMANBIO

ZI314-2羊抗人IgG、A、M-RBITC1mlZOMANBIO

ZI315-1羊抗兔IgG（全分子）-FITC0.5mlZOMANBIO

ZI315-2羊抗兔IgG（全分子）-FITC1mlZOMANBIO

ZI315-3羊抗兔IgG（全分子）-FITC5mlZOMANBIO

ZI316-1羊抗兔（全分子）-RBITC0.5mlZOMANBIO

ZI316-2羊抗兔（全分子）-RBITC1mlZOMANBIO

ZI316-3羊抗兔（全分子）-RBITC5mlZOMANBIO

ZI317-1羊抗小鼠IgG（全分子）-FITC0.5mlZOMANBIO

ZI317-2羊抗小鼠IgG（全分子）-FITC1mlZOMANBIO

ZI317-3羊抗小鼠IgG（全分子）-FITC5mlZOMANBIO