TAQ DNA 连接酶（TAQ DNA LIGASE)

 数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 1000U
Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此，可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内，Taq DNA 连接酶均有活性。它具体有下列特点：1. 耐热性好2. 可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸3. 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测4. 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变

1．感受态的制备

（1）TAQ DNA 连接酶（TAQ DNA LIGASE)接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）TAQ DNA 连接酶（TAQ DNA LIGASE)加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

TAQ DNA 连接酶（TAQ DNA LIGASE)载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，TAQ DNA 连接酶（TAQ DNA LIGASE)在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 D6945-01Plasmid Mini Kit II(50)

D6945-02Plasmid Mini Kit II(200)

质粒中量提取试剂盒：从25-50ml细菌培养液中纯化200-250ug高纯度的质粒DNA

D6904-01Plasmid Midi Kit(10)

D6904-03Plasmid Midi Kit(25)

D6904-04Plasmid Midi Kit(100)

质粒大量提取试剂盒：从200-250ml细菌培养液中提取1.5mg质粒DNA

D6922-00Plasmid Maxi Kit(2)

D6922-01Plasmid Maxi Kit(5)

D6922-02Plasmid Maxi Kit(20)

酵母质粒提取试剂盒：从5ml酵母培养基中提取1ug的质粒DNA

D3376-00Yeast Plasmid Kit (5)-V Spin Column

D3376-01Yeast Plasmid Kit (50)-V Spin Column