TFL DNA聚合酶

 数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 100U
Tfl DNA Polymerase (Tfl DNA 聚合酶) 是从黄色栖热菌(Thermus flavus ) 中提取的热稳定性酶，分子量大约为94kDa。这种酶可在74℃复制 DNA，在95℃的半衰期为40 分钟。Tfl DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿5` → 3` 方向发生聚合反应，形成双链DNA；也可在镁离子存在条件下以RNA 为模板沿5` → 3`方向合成DNA。该酶具有5` → 3` 外切酶活力。当使用Tfl DNA 聚合酶进行PCR 反应和引物延伸反应时，推荐在较高温度条件下进行。本产品随酶提供的10× 反应缓冲液中不含有Mg2+。单独提供足量的25mM MgSO4 溶液以便于在不同条件下优化酶反应。

1．感受态的制备

（1）TFL DNA聚合酶接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）TFL DNA聚合酶加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

TFL DNA聚合酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，TFL DNA聚合酶在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 M1027-01Mag-Bind Plant DNA Kit(2x96)

M1027-02Mag-Bind Plant DNA Kit(8x96)

真菌ＤＮＡ抽提试剂盒

真菌DNA小量提取试剂盒：从100mg真菌组织或细胞中提取基因组DNA

D3390-00Fungal DNA Kit(5)

D3390-01Fungal DNA Kit(50)

D3390-02Fungal DNA Kit(200)

D1090-01E-Z 96 Fungal DNA Kit(2x96)

D1090-02E-Z 96 Fungal DNA Kit(8x96)

真菌DNA中量提取试剂盒：从500mg新鲜真菌组织或150mg干燥真菌组织提取基因组DNA

D3590-01Fungal DNA Midi Kit(10)

D3590-02Fungal DNA Midi Kit(25)

真菌DNA大量提取试剂盒：从1g真菌组织样品中提取基因组DNA