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Tth DNA聚合酶

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2016/9/26 14:02:10更新时间:2024/12/23 14:59:34

产品摘要:TTH DNA聚合酶快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

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详细内容

 TTH DNA聚合酶

 数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下,具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应,但耐热性比Taq酶高,因此对高GC含量模板的PCR也有较好的效果。本酶基本上没有3'→5'外切酶活性及5'→3'外切酶活性,所以也可用于双脱氧法测序。另外,本酶具有RTase 活性,在Mn2+存在的情况下,RTase活性会得到强化。利用该特性,可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应,即一步法RT PCR。(但是,在Mn2+存在时,RT-PCR的准确性不高)此外,本酶与Taq DNA多聚酶一样,PCR产物可通过T载体进行TA克隆。它具有下列特点:1. RT-PCR反应的特异性增加:在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性。2. 二级结构减少:在较高的温度下进行逆转录,减少了由于RNA二级结构引起的问题。

1.感受态的制备

1TTH DNA聚合酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。

2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇46hA590=0.40.6

3)倒入50ml管内,水浴10min,以25003000rpm离心5min,弃上清。

4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。

5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴12h

2.重组DNA的转化

1)将3Eppendorf管按下列转化项目作好标记:

2)冰浴30min1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。

342℃90s

437℃水浴5min

5TTH DNA聚合酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴3060min

6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。

TTH DNA聚合酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体,TTH DNA聚合酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

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