末端脱氧核苷转移酶
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蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
生化试剂
标准品/对照品
详细内容
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 500U
末端脱氧核柑转移酶 TdT是一种模板非依赖型DNA聚合酶,催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3’-OH重复添加脱氧核糖核苷酸。TdT反应需要含有至少3个碱基的短序列作为引物。以RNA为模板时,TdT性能严格依赖于受体RNA 3’-末端的三级结构和核柑酸的种类。总的来说,TdT对RNA模板的作用效率比DNA模板低。此产品特点是: 通过Okayama-Berg 法给载体或cDNA加上互补同聚尾。线性双链DNA的各类3’-OH末端同聚物加尾。 寡聚脱氧核苷酸和DNA标记5’-RACE(快速扩增cDNA末端)凋亡反应的原位定位。
1.感受态的制备
(1)末端脱氧核苷转移酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)末端脱氧核苷转移酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
末端脱氧核苷转移酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,末端脱氧核苷转移酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
M6246-01Mag-Bind Viral DNA/RNA Kit(1x96)_
M6246-02Mag-Bind Viral DNA/RNA Kit(4x96)
磁珠MRNA提取试剂盒:不带总RNA提取试剂
R6520-01Mag-Bind mRNA Enrichment Kit(10)
R6520-02Mag-Bind mRNA Enrichment Kit(30)
磁珠MRNA提取试剂盒:
R6570-01Mag-Bind mRNA Kit(10)
R6570-02Mag-Bind mRNA Kit(30)
Oligo纤维素Mrna抽提试剂盒
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粪便RNA提取试剂盒