编号:25-01000

规格:250 mL

1．感受态的制备

（1）BORATE BUFFER（硼酸盐缓冲液），0.5M,PH9.0接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）BORATE BUFFER（硼酸盐缓冲液），0.5M,PH9.0加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

BORATE BUFFER（硼酸盐缓冲液），0.5M,PH9.0载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，BORATE BUFFER（硼酸盐缓冲液），0.5M,PH9.0在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 M1252-01Mag-Bind Endo-free Plasmid Maxi Kit(5)

M1252-02Mag-Bind Endo-free Plasmid Maxi Kit(20)

产品编号产品名称

磁珠无内毒素提取试剂盒：

M1253-01Mag-Bind Endo-free Plasmid Mega Kit(5)

M1253-02Mag-Bind Endo-free Plasmid Mega Kit(20)

磁珠质粒大量提取试剂盒：从200-250ml培养过夜菌液中提取1000-2000ug的质粒

M1257-01Mag-Bind Plasmid Maxi Kit(5)

M1257-02Mag-Bind Plasmid Maxi Kit(20)

磁珠质粒超大量提取试剂盒：从1-2L培养过夜的菌液中提取2-5mg的质粒

M1259-01Mag-Bind Plasmid Mega Kit(5)

M1259-02Mag-Bind Plasmid Mega Kit(20)

BAC/PAC大型质粒提取试剂盒：从1-5ml培养过夜的菌液中提取30ug BAC/PAC/P1等大片段质粒

D2156-01BAC/PAC DNA Kit （50）

D2156-02BAC/PAC DNA Kit （200）

D1055-01Fastfilter BAC/PAC DNA Kit （4x96）