编号:25-01440

规格:250 mL

1．感受态的制备

（1）CITRATE BUFFER（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,PH2.5接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）CITRATE BUFFER（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,PH2.5加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。 

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

CITRATE BUFFER（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,PH2.5载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，CITRATE BUFFER（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,PH2.5在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

 质粒相关溶液

PS001Solution I, 250ml

PS002Solution II, 250ml

PS003Solution III, 250ml

PS004Neutralization Buffer, 250ml

PS005Buffer SE, 250ml

PS006Buffer T1, 250ml

PS007Buffer T2, 250ml

PS008Buffer T3, 250ml

PS009Buffer HB, 250ml

PS010DNA Wash Buffer Concentrate, 100 ml

PS011DNA Wash Buffer Concentrate, 500ml

PS012ETR Reagent, 100ml

PS013MGC Binding Buffer Concentrate, 20ml