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大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒
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详细内容
货号: | YH1661 |
样本: | 细胞上清液,血浆,组织均浆,血清等 |
标记物: | HRP/生物素 |
适应物种: | 大鼠 |
应用: | 科研研究用 |
检测方法: | ELISA |
检测限: | 详看说明书 |
供应商: | 上海依赫生物 |
数量: | 888 |
规格: | 48T/96T |
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用 ? ?途: 用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中肌酐(Cre)的测定。
检测原理
本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样中大鼠肌酐(Cre)的水平。向预先包被了大鼠肌酐(Cre)单克隆抗体的酶标孔中加入肌酐(Cre),温育;温育后,加入生物素标记的抗肌酐(Cre) 抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅与样中大鼠肌酐(Cre)的浓度呈正相关。
试剂盒组成?
? ? ? ? ?名 ?称 96孔配置
12孔×8条 48孔配置
12孔×4条 备 ?注
?1 ?标准(120ng/ml) 0.5ml 0.5ml 稀释即用型
?2 ? 酶标包被板 1块 1块 已包被即用型
?3 标准稀释液 3ml 3ml 即用型
?4 链霉亲和素-HRP 6ml 3ml 即用型
?5 30x倍浓缩洗涤液 20ml 20ml 蒸馏水稀释
?6 生物素标记的抗肌酐(Cre) 抗体 2ml 2ml 即用型
?7 显色剂A液 6ml 3ml 即用型
?8 显色剂B液 6ml 3ml 即用型
?9 终止液 6ml 3ml 即用型
10 说明书 1份 1份 即用型
11 封板膜 2张 2张 不可反复使用
12 密封袋 1个 1个 即用型
操作程序
1.标准的稀释:(本试剂系统提供原倍标准支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释)按下表格执行:
?60ng/ml (5号标准) 120μl的原倍标准加入120μl的标准稀释液
?30ng/ml (4号标准) 120μl的5号标准加入120μl的标准稀释液
? ?15ng/ml (3号标准) 120μl的4号标准加入120μl的标准稀释液
? 7.5ng/ml (2号标准) 120μl的3号标准加入120μl的标准稀释液
? 3.75ng/ml (1号标准) 120μl的2号标准加入120μl的标准稀释液
2.根据待测样数量加上标准的数量决定所需的板条数。每个标准和空白孔建议做复孔。每个样根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.加样:1)空白孔:(空白对照孔不加样,生物素标记的抗肌酐(Cre)抗体,链霉亲和素-HRP,其余各步操作相同 ;2)标准孔:加入标准50μl,链霉亲和素-HRP50μl(标准中已事先整合好生物素标记抗体,故在操作时不加,只加链霉素-HRP);3)样本反应孔:加入样本40μl,然后各加入抗肌酐(Cre)抗体10μl、链霉亲和素-HRP(空白孔除外)50μl。盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育60分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。
7.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后10分钟。
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