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人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)ELISA试剂盒
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详细内容
货号: | YH0879 |
样本: | 细胞上清液,血浆,组织均浆,血清等 |
标记物: | HRP/生物素 |
适应物种: | 人 |
应用: | 科研研究用 |
检测方法: | ELISA |
检测限: | 详看说明书 |
供应商: | 上海依赫生物 |
数量: | 长期供应 |
规格: | 48T/96T |
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
①上海依赫生物:专业生产ELISA试剂盒8年,是主要以批发,零售为主的专业公司,我们可以做到产质量优,价格低。
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⑤由于产多发布的产没有详细说明书,详细操作步骤说明书请于客服联系。
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 ??????目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中蓝耳病(PRRS)水平。
实验原理:
??本试剂盒采用双抗体夹心法测定血清或血浆中猪蓝耳病(PRRS)。用纯化的猪蓝耳病(PRRS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样中蓝耳病(PRRS)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的蓝耳病(PRRS)抗体结合,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猪蓝耳病(PRRS)的存在与否。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1.编号:将样对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照(标准)100μl。然后在待测样孔先加样稀释液50μl,然后再加待测样50μl。轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 ??
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至1000ml后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl(或滴),空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl(或滴),再加入显色剂B 50μl(或滴),轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10.终止:每孔加终止液50μl(或滴),终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
结果判定:
??试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
??临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.10(阴性对照平均值低于0.05按0.05计算)
??阴性判定:样OD值< 临界值(CUT OFF)者为蓝耳病(PRRS)阴性
??阳性判定:样OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为蓝耳病(PRRS)阳性
注意事项
1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4.封板膜只限次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm
7.所有样,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
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