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怎样选择合适的胎牛血清?

点击次数:20 发布时间:2023/10/12 14:07:05
 怎样筛选合适的胎牛血清是细胞培养中一个非常关键的步骤。先,将产品测定其pH值,要保持在7.47.6pH范围内;接下来,要检查有效成分, 检查其中的细胞因子、培养基添加剂和免疫抑制因子的质量水平;细胞存活率的测定也很重要,由于内毒素直接参与细胞凋亡,对细胞培养结果影响较大,内毒素含量越少,牛血清的质量越高,细胞的生存率和能力也越高,可以替代部分试剂中添加的有机物。

有下列情况者,对血清内毒素应格外留意筛选:

1. 培养干细胞时:干细胞对内毒素非常敏感,如果血清中内毒素过高,干细胞很容易死亡,因此,选择高等血清非常重要。

2. 免疫细胞时:过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。

3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果失之毫厘,谬以千里。在准备血清和其他试剂时,选择内毒素含量较低的血清,对实验至关重要。

4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选内毒素含量较低的血清,是实验顺利进行的基础。

5.实验室有些细胞,培养周期较长、冻存时间较长,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为了细胞的健康,都应该选用更低内毒素的血清,以避免内毒素长时间对细胞的毒性影响。

总之,血清中内毒素含量过高,更容易导致细胞亚健康,造成数据不准,或细胞状态不良、老化、甚至死亡,导致试验中断失败,因此,血清中的内毒素越低越好。全球细胞培养学会均依据内毒素对血清的品质进行分和命名。

血清中内毒素含量≤10EU/ml时,此血清为特胎牛血清;

血清中内毒素含量﹥10EU/ml≤ 25EU/ml时,此血清为优胎牛血清;

血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时,此血清为标准胎牛血清;

不同厂家,不同批次的血清,内毒素数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明别。但使用者可以通过检测报告,自行甄别挑选,选择合适自己实验的血清。北京沃卡威生物建议在初次选择胎牛血清的时候尽量选择等较高、质量稳定的大品牌血清,如Gibco 10099-141 澳洲血源胎牛血清、Gibco 16000-044 南美血源胎牛血清等,其内毒素含量均≤10EU/ml,且批次间差异小,质量稳定,从而能获得更好更稳定的实验结果。

 

原创作者:沃卡威(北京)生物技术有限公司

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