1. 血清怎么储存？

    血清在生产制备完成后，通过质量检测，然后被运送至市场上销售。整个过程中，包括运输流程，储存温度应严格控制在-20℃，避免反复冻融影响血清活性。在未解冻的情况下，血清可储存在在-20℃或-80℃环境中，只要是在保质期内，均能正常使用。另外，尽量将血清独立存放于一定区域（恒温区域），避免反复开关冰箱门对储存温度造成影响。

一般血清在-20℃以下的环境保存有效期为5年，但特殊情况可以更久，例如plasmalab过敏血清，其所有血清样本都是由实验室用thermo的immunocap方法检测出具报告，血清样本的运输和储存温度都严格控制在-20℃以下，其有效期甚至可以达到10年以上。

解冻后的血清如果短时间内需要反复使用，未避免反复冻融，可以放在4℃冰箱保存，但不宜放置过久，因为正常血清中不含有抗菌成分，在4℃冰箱中很容易染菌，即使配制为培养基，添加了双抗，可以在一定程度上减少培养基污染的风险，但是由于基础培养基的添加，使得整体成分更为复杂，保存不当则会使有效物质活性降低。

因此，我们建议：血清应放置在-20℃以下冷冻保存，使用过程中添加了血清的培养基尽量做到现配现用，解冻后的血清不要储存在4℃冰箱中时间过长，尽可能不要超过7天。

2. 血清是否能够反复冻融？

答案是否定的，有研究表明血清的冻融次数一般不要超过3次，反复冻融会降低血清中营养成分的浓度和免疫球蛋白的活性。因为血清中很多活性物质本身不稳定，反复冻融的过程中，因为温度的影响会造成很多活性物质聚合或者降解，从而失效。因此，我们建议不要反复冻融血清。

3. 如何避免血清反复冻融？

    实验室常用的解决办法就是对血清进行分装，一般血清拿到手后次使用解冻，应该根据实验的要求或者自己常用的量（体积）进行无菌分装，然后每次用多少取多少，这样才能确保血清的质量稳定。如果收到的血清量大，而每次使用量较小，或者每次使用量不确定，也可以分分装。例如500ml血清，可以先用50ml的无菌管分装8支，再用10ml的无菌管分装8支，然后剩余的血清用2ml无菌冻存管分装，当小体积的血清用完后，就可以取一支上的血清再分装，并且使用量也可以随意搭配，这样即兼顾实用性，又能确保每一次使用的血清都是冻融三次以内的。需要注意的是：血清分装时，须规则摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一。

4. 血清如何解冻？

当血清需要被解冻时，我们不建议大家把刚从-20℃中拿出的冰冻血清，直接放入4℃冰箱中过夜融化，也不要在室温进行过夜解冻。由于血清含有蛋白质等干物质，这类物质容易先融化析出，水这类溶剂后融化，导致血清产生沉淀，影响使用效果。因此，要尽可能使所有成分同步融化，因此我们建议使用三步法融化，具体步骤见下表。

需要注意的是：如果血清是储存在-80℃冰箱中，三步法解冻，应先将血清转移至-20℃冰箱中存放1-2天。

5. 为什么血清没有反复冻融，也正确解冻了还是会出现沉淀？如何解决？

因为血清在融化时，冰块和蛋白融化的速度是不一样的，局部可能因蛋白浓度过高聚合而产生沉淀，而且一般的血清是没有脱脂的，在融化过程中，一些脂类物质也会因为温度低，溶解度下降而析出。同时，如果血清内含有少量纤维蛋白原，那么在低温下也可以形成絮状沉淀，等到血清再融化时，沉淀就显现出来了。

因此，我们建议：在解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，这样可以有效减少沉淀的发生。即使出现沉淀，也不要惊慌，可以在无菌条件下，可用离心3000rpm， 5分钟去除，不会影响血清本身的质量。

原创作者：沃卡威（北京）生物技术有限公司