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猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA检测试剂盒免费代测

点击次数:226发布时间:2016/8/4 0:36:41

猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA检测试剂盒免费代测

更新日期:2017/7/25 2:06:34

所 在 地:中国大陆

产品型号:

品牌名称:上海酶远

简单介绍:猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA检测试剂盒免费代测公司自主研发ELISA试剂盒,低价销售。公司原装ELISA试剂盒、进口ELISA试剂盒、国产ELISA试剂盒,免费代测,实验过程提供完整的技术指导,所有试剂盒均经过充分验证,确保有效性重复性。

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猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA检测试剂盒免费代测

简介:

【规格】:96T/48T

【标本】:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

【特点】:专一性强、灵敏度高、样品易保存、结果易观察、可以定量测定、可以大规模测定样品、仪器和试剂简单。

【运输】:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)

使用方法:

1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。

5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

操作步骤:

1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液11稀释后加入50ul于反应孔内。

3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7)每孔加入底物AB50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

猪高铁血红蛋白(MHB)ELISA检测试剂盒免费代测

操作注意事项:

1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。

5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法:

 

1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.

 

上海酶远“猪elisa试剂盒"的五大优点:

一、高效、灵敏、特异的抗体;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

五、限度的节省实验经费。

抗体的酶标记方法及标记效果测定:良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加硼氢化钠(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即得到酶标抗体,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,进行测定后,冷冻干燥或低温保存。

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