鱼乙酰胆碱酯酶(AChE)elisa试剂盒操作方法

elisa试剂盒简介:

【规格】：96T/48T

【标本】：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

【特点】：专一性强、灵敏度高、样品易保存、结果易观察、可以定量测定、可以大规模测定样品、仪器和试剂简单。

【运输】：快递(根据客户要求，选择具体的运输方式)

Elisa试剂盒使用方法：

1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

Elisa试剂盒技术原理：

  (1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

  (2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

  (3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

  (4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

  (5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

  (6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

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鱼乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒操作方法

Elisa试剂盒操作步骤:

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

上海酶远生物科技有限公司专业提供ELISA试剂盒，种属齐全，指标成千上万种,质量好发货及时，稳定的重复性和可靠高,特异性强，优秀的技术团队竭诚为您服务。

1.浓缩洗涤液(100X)用双蒸水稀释成1X（至500ml）。

2标准品用1ml标准品稀释液复溶。得到2000pg/ml的高浓度标准品。高浓度标准品可保存于-20?C。

3.将2000pg/ml的高浓度标准品稀释成一组标准品，如： 1000, 500, 250, 125, 62,5,31.25, 0pg/ml。

4.配制1x HRP：一支 HRP加入6 ml 酶联物稀释液，混匀。1xHRP在临用前15分钟配制。

5.配制1x Biotin：一支Biotinanti rat IL-10加入6 ml Biotin稀释液，混匀。1x Biotin在临用前15分钟配制。

ELISA试剂盒组成展示：

1、30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2、酶标试剂 6ml×1瓶8标准品(240 ng/L)0.5ml×1瓶

3、酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)ELISA试剂盒订货说明：

1）确保所订产品与目录技术指标保持一致。

2）确保买方产品在运输中的质量，对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。

3）收到货物后如出现质量问题，买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。

4）出现质量以外的问题，如破损等，买方应在收货后一个周内提出。

鱼乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒操作方法

Elisa试剂盒技术原理及自备设备：

ELISA技术原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

自备设备有，蒸馏水，加样器，振荡器及磁力搅拌器，酶标仪，量筒，烧杯，吸水纸，坐标纸，温育箱，洗瓶，一次性试剂管，微移液及其吸嘴等。

用3个质控血清测定值即可进行质控，当这组数据扩大到20次有效值时就可以计算RCV的X。质量控制在整个过程中有着举足轻重的关系，0.1%的不慎也会引起100%的失败。该试剂盒敏感度极佳，其预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10％。每一个产品都经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验，均可满足广泛的检测需求。我们严格按照标准生产方案组装生产，配置完善的售后服务和免费的技术支持，可让您无后顾之忧。

Elisa试剂盒注意事项：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．  请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay（简写ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验，本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。

ELISA试剂盒 样本要求:

1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

ELISA试剂盒注意事项

1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。

5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（0.1-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本*终浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。

8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。

9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

“ELISA试剂盒”独具特色优势：

1、产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单；

2、发货及时；

3、免费提供ELISA试剂盒待测服务，上海拥有自己的实验和技术团队，公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持，解决实验过程中遇到的问题；

4、免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。   

    咨询订购产品，您也可以拨打我公司业务员的电话，或者本网站中留言（会在半个工作日内给您回复去电话），上海酶远“人微球蛋白ELISA试剂盒”感谢大家的支持！

上海酶远完善的销售服务

1. 售前：为客户提供全面技术咨询服务并提供说明书，任何咨询都会细心答复，无论购买与否；

 2. 售后：所有的elisa试剂盒如有质量问题，免费包换，为客户提供elisa试剂盒来样代测服务（免费），保证五个工作日内出结果，每个技术性的问题我们都会为您耐心解决。

酶联免疫的加样，在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定（如间接法ELISA）需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。

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