鱼胰岛素受体(ISR)elisa试剂盒操作方法

elisa试剂盒简介:

【规格】：96T/48T

【标本】：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

【特点】：专一性强、灵敏度高、样品易保存、结果易观察、可以定量测定、可以大规模测定样品、仪器和试剂简单。

【运输】：快递(根据客户要求，选择具体的运输方式)

Elisa试剂盒使用方法：

1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

Elisa试剂盒技术原理：

  (1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

  (2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

  (3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

  (4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

  (5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

  (6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

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鱼胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒操作方法

Elisa试剂盒操作步骤:

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

上海酶远生物科技有限公司专业提供ELISA试剂盒，种属齐全，指标成千上万种,质量好发货及时，稳定的重复性和可靠高,特异性强，优秀的技术团队竭诚为您服务。

1.浓缩洗涤液(100X)用双蒸水稀释成1X（至500ml）。

2标准品用1ml标准品稀释液复溶。得到2000pg/ml的高浓度标准品。高浓度标准品可保存于-20?C。

3.将2000pg/ml的高浓度标准品稀释成一组标准品，如： 1000, 500, 250, 125, 62,5,31.25, 0pg/ml。

4.配制1x HRP：一支 HRP加入6 ml 酶联物稀释液，混匀。1xHRP在临用前15分钟配制。

5.配制1x Biotin：一支Biotinanti rat IL-10加入6 ml Biotin稀释液，混匀。1x Biotin在临用前15分钟配制。

ELISA试剂盒组成展示：

1、30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2、酶标试剂 6ml×1瓶8标准品(240 ng/L)0.5ml×1瓶

3、酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)ELISA试剂盒订货说明：

1）确保所订产品与目录技术指标保持一致。

2）确保买方产品在运输中的质量，对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。

3）收到货物后如出现质量问题，买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。

4）出现质量以外的问题，如破损等，买方应在收货后一个周内提出。

鱼胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒操作方法

Elisa试剂盒技术原理及自备设备：

ELISA技术原理是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

自备设备有，蒸馏水，加样器，振荡器及磁力搅拌器，酶标仪，量筒，烧杯，吸水纸，坐标纸，温育箱，洗瓶，一次性试剂管，微移液及其吸嘴等。

用3个质控血清测定值即可进行质控，当这组数据扩大到20次有效值时就可以计算RCV的X。质量控制在整个过程中有着举足轻重的关系，0.1%的不慎也会引起100%的失败。该试剂盒敏感度极佳，其预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10％。每一个产品都经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验，均可满足广泛的检测需求。我们严格按照标准生产方案组装生产，配置完善的售后服务和免费的技术支持，可让您无后顾之忧。

Elisa试剂盒注意事项：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．  请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

酶联免疫方法标本的采取和保存，可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

ELISA试剂盒 样本要求:

1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

ELISA试剂盒注意事项

1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。

5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（0.1-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本*终浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。

8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。

9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

“ELISA试剂盒”独具特色优势：

1、产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单；

2、发货及时；

3、免费提供ELISA试剂盒待测服务，上海拥有自己的实验和技术团队，公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持，解决实验过程中遇到的问题；

4、免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。   

    咨询订购产品，您也可以拨打我公司业务员的电话，或者本网站中留言（会在半个工作日内给您回复去电话），上海酶远“人微球蛋白ELISA试剂盒”感谢大家的支持！

上海酶远完善的销售服务

1. 售前：为客户提供全面技术咨询服务并提供说明书，任何咨询都会细心答复，无论购买与否；

 2. 售后：所有的elisa试剂盒如有质量问题，免费包换，为客户提供elisa试剂盒来样代测服务（免费），保证五个工作日内出结果，每个技术性的问题我们都会为您耐心解决。

1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，*后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

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