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猴白介素2(IL-2)elisa试剂盒操作方法
猴ELISA试剂盒简介:
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时)
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输:快递运输,可根据客户要求,选择具体的运输方式
猴ELISA试剂盒产品优势:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
六、价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
猴ELISA试剂盒实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100μL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100μL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分钟;
8. 加终止液50μL,立即450nm读数。
猴ELISA试剂盒实验原理:
将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
猴白介素2(IL-2)elisa试剂盒操作方法
猴ELISA试剂盒独具特点:
1. 灵敏,准确和一致的性能;
2. 用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证;
3. 在半天内可完成的现成、方便的检测。
对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心“人ELISA试剂盒"模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。
具体测定方法如下:
1.首先以双抗体于碳酸盐缓冲液中4℃下包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。
2.加入含待测物的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。
3.加入酶标记的双抗体之二,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。
4.加入酶底物,温育显色测定。
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,*后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
猴ELISA试剂盒实验过程中需要用到的实验室器材:
1、标准规格酶标仪;
2、 高速离心机;
3、电热恒温培养箱;
4、干净的试管和Eppendof管;
5、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器;
6、蒸馏水,容量瓶等。
猴ELISA试剂盒组成:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
猴白介素2(IL-2)ELISA试剂盒操作方法
猴ELISA试剂盒怎样购买?
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辣根过氧化物酶(HRP) 过氧化物酶广泛分布于植物中,辣根中含量,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的*适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。酶蛋白和辅基的吸收光谱分别为275nm和403nm。
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