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牛纤维蛋白原(Fg)elisa试剂盒操作方法
牛ELISA试剂盒简介:
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时)
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输:快递运输,可根据客户要求,选择具体的运输方式
牛ELISA试剂盒产品优势:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
六、价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
牛ELISA试剂盒实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100μL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100μL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分钟;
8. 加终止液50μL,立即450nm读数。
标本的采集及保存:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 xg离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。*后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
酶联免疫种类主要有:(1)自身免疫检测试剂盒,包括ELISA和IFA类诊断试剂;(2)细胞因子elisa试剂盒,包括人、大鼠、小鼠、兔、狗、羊、猴子、猪、豚鼠、马类血清、尿、细胞培养上清液检测试剂盒;(3)流式细胞仪用试剂类,包括CD系列、细胞因子系列等;(4)乳胶手工及上机试剂,包括透光比浊检测试剂;(5)内分泌检测试剂盒,包括微色谱柱类检测试剂;(6)肿瘤标记物检测试剂;(7)微生物传染病检测试剂,包括性病类及其它传染病类检测试剂;(8)实验室仪器类,包括BTS-330大屏幕半自动生化分析仪、MiniNeph微量蛋白散色比浊仪及相关试剂;(9)pcr及相关试剂;(10)肝纤维化检测;(11)单克隆抗体;(12)ELISPOT:细胞因子的全新解决方案;(13)特种蛋白;(14)微色谱柱;(15)优生优育TORCH;(16)生化试剂;(17)抗体;(18)细胞株;(19)其它分子生物学研究用试剂。
牛ELISA试剂盒实验原理:
将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
牛纤维蛋白原(Fg)ELISA试剂盒操作方法
牛ELISA试剂盒独具特点:
1. 灵敏,准确和一致的性能;
2. 用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证;
3. 在半天内可完成的现成、方便的检测。
对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心“人ELISA试剂盒"模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。
具体测定方法如下:
1.首先以双抗体于碳酸盐缓冲液中4℃下包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。
2.加入含待测物的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。
3.加入酶标记的双抗体之二,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。
4.加入酶底物,温育显色测定。
目前ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面,ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
牛ELISA试剂盒实验过程中需要用到的实验室器材:
1、标准规格酶标仪;
2、 高速离心机;
3、电热恒温培养箱;
4、干净的试管和Eppendof管;
5、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器;
6、蒸馏水,容量瓶等。
牛ELISA试剂盒组成:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
牛纤维蛋白原(Fg)ELISA试剂盒操作方法
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上海酶远ELISA试剂盒免费代测、送货上门
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
您于我公司购买产品后有任何疑问,都可以打电话给我公司业务员,我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间,我们还提供免费代实验,只要你把样品邮寄给我们,我们会在5-7个工作日内完成,并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话,您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系,我们将竭诚为您服务,祝您工作愉快!
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