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鸡流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA检测试剂盒操作方法
鸡ELISA试剂盒简介:
产品规格:96T/48T 中英文双版说明书 提供代测 含税含运费
经营品牌:R&D TSZ
产品保存:2-8℃。
有 效 期:6个月
供 应 商:上海酶远物科技有限公司
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
浸泡式洗涤:
1. 吸干或甩干孔内反应液;
2. 用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
3. 浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
4. 吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
5. 重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
鸡ELISA试剂盒产品优势:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
六、价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
鸡ELISA试剂盒实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100μL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100μL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分钟;
8. 加终止液50μL,立即450nm读数。
鸡ELISA试剂盒标本的采集及保存:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 xg离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。*后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
酶联免疫方法标本的采取和保存,可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
鸡ELISA试剂盒实验原理:
将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
鸡流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA检测试剂盒操作方法
鸡ELISA试剂盒独具特点:
1. 灵敏,准确和一致的性能;
2. 用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证;
3. 在半天内可完成的现成、方便的检测。
对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心“人ELISA试剂盒"模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。
具体测定方法如下:
1.首先以双抗体于碳酸盐缓冲液中4℃下包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。
2.加入含待测物的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。
3.加入酶标记的双抗体之二,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。
4.加入酶底物,温育显色测定。
用于ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果较好,达 1000(g/ml时效果。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果较好,1.5-2.0时。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%较好,达30%以上时。(四) ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法的基本类型、用途及操作程序
鸡ELISA试剂盒实验过程中需要用到的实验室器材:
1、标准规格酶标仪;
2、 高速离心机;
3、电热恒温培养箱;
4、干净的试管和Eppendof管;
5、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器;
6、蒸馏水,容量瓶等。
鸡ELISA试剂盒组成:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
鸡流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)ELISA检测试剂盒操作方法
鸡ELISA试剂盒怎样购买?
1、您确认好了产品后可直接和我们在线联系,或者是电话联系,确认您购买的产品。
2、可以把您需要购买的产品确认好以邮件的形式发给我们,这样您会在24小时内收到我们给您回复确认的邮件,或者是电话。
邮寄(免运费)产品:现货一般当天定购,隔天由仓库统一出货;期货会在出货前由专人通知,仓库备货,依其产品性能,路途等选择进行包装邮寄,客户如有特别要求,可与销售人员提前沟通。
上海酶远鸡ELISA试剂盒免费代测、送货上门
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
您于我公司购买产品后有任何疑问,都可以打电话给我公司业务员,我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间,我们还提供免费代实验,只要你把样品邮寄给我们,我们会在5-7个工作日内完成,并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话,您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系,我们将竭诚为您服务,祝您工作愉快!
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鸡热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒
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