绵羊二醇受体(ER-Alpha)elisa试剂盒操作方法

羊ELISA试剂盒简介：

上海酶远物为您提供各种种属、各种系列的ELISA检测试剂盒，仅限于实验室科学研究用，不适用于临床诊断。公司提供免费代测服务，详情请来电咨询或咨询在线人员。

可测种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马…

可测标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液

产品规格：96T/48T 中英文双版说明书 提供代测 含税含运费

经营品牌：R&D，TSZ

有 效 期：6个月

运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。

检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法

保存温度：短期4℃/长期-20℃保存

应用范围：科研用检测试剂

羊ELISA试剂盒产品优势：

一、高效、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；

六、价格优惠，质量保证，限度的节省实验经费。

羊ELISA试剂盒标本的采集及保存:

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本的稀释原则：

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。*后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

生物素标记抗体的稀释原则：

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

羊ELISA试剂盒实验流程:

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；

2. 加样（标准品及样本）100μL，37°C孵育1小时；

3. 吸弃，加检测溶液A100μL，37°C孵育1小时；

4. 洗板3次；

5. 加检测溶液B100μL，37°C孵育30分钟；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育15－25分钟；

8. 加终止液50μL，立即450nm读数。

抗体的酶标记方法及标记效果测定：良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性吸附。酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml，混匀并装透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时（或过夜）使之结合，然后吸出，加硼氢化钠（NaBH4）溶液（ 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小时，将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液，置4℃冰箱30分钟后离心，将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中，并对之透析过夜（4℃），次日离心除去不溶物，即得到酶标抗体，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，进行测定后，冷冻干燥或低温保存。

羊ELISA试剂盒实验原理:

将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

羊ELISA试剂盒实验过程中需要用到的实验室器材：

1、标准规格酶标仪;

2、 高速离心机;

3、电热恒温培养箱;

4、干净的试管和Eppendof管;

5、系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器;

6、蒸馏水，容量瓶等。

羊ELISA试剂盒组成：

（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（3）酶的底物；

（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；

（5）结合物及标本的稀释液；

（6）洗涤液；

（7）酶反应终止液。

绵羊二醇受体(ER-Alpha)elisa试剂盒操作方法

羊ELISA试剂盒独具特点：

1. 灵敏，准确和一致的性能；

2. 用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证；

3. 在半天内可完成的现成、方便的检测。

对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白，使用双抗体夹心“人ELISA试剂盒"模式测定相当简便，现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。

具体测定方法如下：

  1．首先以双抗体于碳酸盐缓冲液中4℃下包被聚苯乙烯等固相，形成固相抗体，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。

  2．加入含待测物的临床样本如血清等，温育一定时间后洗板；此时，待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。

  3．加入酶标记的双抗体之二，温育一定时间后洗板；此时，在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。

  4．加入酶底物，温育显色测定。

酶联免疫方法标本的采取和保存，可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

绵羊二醇受体(ER-Alpha)ELISA试剂盒操作方法

羊ELISA试剂盒怎样购买？

1、您确认好了产品后可直接和我们在线联系，或者是电话联系，确认您购买的产品。

2、可以把您需要购买的产品确认好以邮件的形式发给我们，这样您会在24小时内收到我们给您回复确认的邮件，或者是电话。

    邮寄（免运费）产品：现货一般当天定购，隔天由仓库统一出货；期货会在出货前由专人通知，仓库备货，依其产品性能，路途等选择进行包装邮寄，客户如有特别要求，可与销售人员提前沟通。

上海酶远羊ELISA试剂盒免费代测、送货上门

运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。

    您于我公司购买产品后有任何疑问，都可以打电话给我公司业务员，我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间，我们还提供免费代实验，只要你把样品邮寄给我们，我们会在5-7个工作日内完成，并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话，您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系，我们将竭诚为您服务，祝您工作愉快！

山羊胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒
山羊胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒
山羊胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒
山羊胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒
山羊血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒
山羊血红蛋白(HB)ELISA试剂盒
山羊酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)ELISA试剂盒
山羊乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒
山羊乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒
山羊尿皮质素1(UCN1)ELISA试剂盒
山羊结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒
山羊窖蛋白(CAV1)ELISA试剂盒
山羊基质金属蛋白酶7(MMP7)ELISA试剂盒
山羊基质金属蛋白酶13(MMP13)ELISA试剂盒
山羊黄体激素(LH)ELISA试剂盒
山羊红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒
山羊骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒
山羊骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒
山羊干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒
山羊防御素β2(DEFβ2)ELISA试剂盒
山羊补体因子B(CFB)ELISA试剂盒
山羊半乳凝素14(GAL14)ELISA试剂盒
山羊半乳凝素1(GAL1)ELISA试剂盒
山羊白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒
山羊白介素8(IL8)ELISA试剂盒
山羊白介素6(IL6)ELISA试剂盒
山羊白介素5(IL5)ELISA试剂盒
山羊白介素4(IL4)ELISA试剂盒
山羊白介素3(IL3)ELISA试剂盒
山羊白介素2(IL2)ELISA试剂盒
山羊白介素1受体拮抗剂(IL1RA)ELISA试剂盒
山羊白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒
山羊白介素18(IL18)ELISA试剂盒
山羊白介素15(IL15)ELISA试剂盒
山羊白介素13(IL13)ELISA试剂盒
山羊白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒
山羊白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒
山羊白介素10(IL10)ELISA试剂盒
山羊α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒
山羊E选择素(SELE)ELISA试剂盒
绵羊组胺(HIS)ELISA试剂盒
绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒
绵羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒
绵羊中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒
绵羊脂联素(ADIPOQ)ELISA试剂盒
绵羊孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒
绵羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
绵羊游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒
绵羊游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒
绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒
绵羊胰岛素(INS)ELISA试剂盒
绵羊血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
绵羊血管生成素2(ANG-2/ANGPT2)ELISA试剂盒
绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒
绵羊铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒
绵羊甜菜碱-同型半胱氨酸S-甲基转移酶1(BHMT)ELISA试剂盒
绵羊髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒
绵羊双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒
绵羊生长激素(GH)ELISA试剂盒
绵羊三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
绵羊溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒
绵羊热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒
绵羊皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒
绵羊皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒
绵羊内皮素1受体(EDNRA)ELISA试剂盒
绵羊缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒
绵羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒
绵羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
绵羊免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒
绵羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒
绵羊卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒
绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒
绵羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒
绵羊巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒
绵羊结合珠蛋白/触珠蛋白(HP)ELISA试剂盒
绵羊窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA试剂盒
绵羊甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
绵羊基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/Gelatinase B)ELISA试剂盒
绵羊基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒
绵羊基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP2/Gelatinase A)ELISA试剂盒
绵羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒
绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒
绵羊环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒
绵羊黄体生成素(LH)ELISA试剂盒
绵羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒
绵羊花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒
绵羊骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒
绵羊睾酮(T)ELISA试剂盒
绵羊甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒
绵羊肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA试剂盒
绵羊肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA试剂盒
绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA试剂盒
绵羊二醇受体(ER-Alpha)ELISA试剂盒
绵羊催产素(OT)ELISA试剂盒
绵羊雌二醇(E2)ELISA试剂盒
绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒
绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA试剂盒
绵羊补体片段3a(C3a)ELISA试剂盒
绵羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒
绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒
绵羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒
绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
绵羊白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒
绵羊白介素13(IL-13)ELISA试剂盒
绵羊白介素12(IL-12)ELISA试剂盒
绵羊白介素10(IL-10)ELISA试剂盒
绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒
绵羊白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒
绵羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒
绵羊C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒
绵羊Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒
绵羊5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)ELISA试剂盒
绵羊5羟二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA试剂盒
绵羊3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒
绵羊17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒
绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒
绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA检测试剂盒
绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒
绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒
绵羊白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒
绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA检测试剂盒
绵羊白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒
绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA检测试剂盒
山羊丙酮检测(acetone)ELISA检测试剂盒
山羊β内啡肽(β-EP)ELISA检测试剂盒
山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒
山羊白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒
山羊白介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒
山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA检测试剂盒
山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA检测试剂盒
山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA检测试剂盒
山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA检测试剂盒