绵羊3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa试剂盒操作方法

“羊ELISA检测试剂盒检测试剂盒”简介

种属：人 大鼠 小鼠 豚鼠 鸡 猪 山羊 牛等

规格：96Ｔ 48T

品牌：ＲＤ  TSZ                           

保存条件：2-8℃低温保存

保质期：六个月

羊ELISA洗涤一般可采用的方法有：

1.吸干孔内反应液；

2.将洗涤液注满板孔；

3.放置2min，略作摇动；

4.吸干孔内液，也可倾去液体后在吸水纸上拍干。洗涤的次数一般为3～4次，有时甚至需洗5～6次。

羊ELISA试剂盒产品优势：

一、高效、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；

六、价格优惠，质量保证，限度的节省实验经费。

羊ELISA试剂盒实验流程:

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；

2. 加样（标准品及样本）100μL，37°C孵育1小时；

3. 吸弃，加检测溶液A100μL，37°C孵育1小时；

4. 洗板3次；

5. 加检测溶液B100μL，37°C孵育30分钟；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育15－25分钟；

8. 加终止液50μL，立即450nm读数。

斑点ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)（Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)） 与常规的微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)比较，Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)具有简便、节省抗原等优点，而且结果可长期保存；但其也有不足，主要是在结果判定上比较主观，特异性不够高等。该方法的主要操作程序为：(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后，稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中，置37℃使硝酸纤维素膜彻底干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40－53个样品，每个压圈可加抗原液1－20μl。

羊ELISA试剂盒实验原理:

将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

羊ELISA试剂盒供应商实验补充说明：

1. 试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，具体以标签上的标示为准。

2. 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

4. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。

5. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，

将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且，洗涤不充分将影响试验结果。

6. 所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

7. 有效期：6个月

8. 中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

羊ELISA试剂盒标本的采集及保存:

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本的稀释原则：

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。*后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

生物素标记抗体的稀释原则：

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

绵羊3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa试剂盒操作方法

“羊ELISA试剂盒"特点:

准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

灵敏度：检测浓度小于10 pg/ml。

特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

在使用之前，要将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。 

1)双抗体夹心法

2)双位点一步法

3)间接法测抗体

4)竞争法

5)捕获法测IgM抗体

6)应用亲和素和生物素

斑点ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)（Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)） 与常规的微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)比较，Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)具有简便、节省抗原等优点，而且结果可长期保存；但其也有不足，主要是在结果判定上比较主观，特异性不够高等。该方法的主要操作程序为：(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后，稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中，置37℃使硝酸纤维素膜彻底干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40－53个样品，每个压圈可加抗原液1－20μl。

羊ELISA试剂盒实验过程中需要用到的实验室器材：

1、标准规格酶标仪;

2、 高速离心机;

3、电热恒温培养箱;

4、干净的试管和Eppendof管;

5、系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器;

6、蒸馏水，容量瓶等。

羊ELISA试剂盒组成：

（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（3）酶的底物；

（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；

（5）结合物及标本的稀释液；

（6）洗涤液；

（7）酶反应终止液。

绵羊3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒操作方法

羊ELISA试剂盒怎样购买？

1、您确认好了产品后可直接和我们在线联系，或者是电话联系，确认您购买的产品。

2、可以把您需要购买的产品确认好以邮件的形式发给我们，这样您会在24小时内收到我们给您回复确认的邮件，或者是电话。

    邮寄（免运费）产品：现货一般当天定购，隔天由仓库统一出货；期货会在出货前由专人通知，仓库备货，依其产品性能，路途等选择进行包装邮寄，客户如有特别要求，可与销售人员提前沟通。

我公司实验室现已拥有多个检测系统：

1．ELISA双抗夹心法检测系统

2．ELISA间接法检测系统

3．ELISA竞争法检测系统

4．ELISA捕获包被法检测系统

5．ABS-ELISA检测系统

羊胰岛素样生长因子II(IGF2)ELISA试剂盒
羊水通道蛋白5(AQP5)ELISA试剂盒
羊生长分化因子9(GDF9)ELISA试剂盒
羊溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒
羊环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒
羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒
羊促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒
羊白介素7(IL7)ELISA试剂盒
羊α晶体B链(CRYAB)ELISA试剂盒
羊游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)ELISA试剂盒
羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒
羊饥饿素(GHRL)ELISA试剂盒
羊干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒
小尾寒羊增食欲素(orexin)ELISA试剂盒
小尾寒羊瘦素(LEP)ELISA试剂盒
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒
山羊转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒
山羊转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒
山羊脂联素(ADP)ELISA试剂盒
山羊脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒
山羊脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒
山羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
山羊胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒
山羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒
山羊胰岛素(INS)ELISA试剂盒
山羊血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒
山羊血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
山羊血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒
山羊血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
山羊血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒
山羊血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒
山羊血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)ELISA试剂盒
山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒
山羊铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒
山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒
山羊瘦素(LEP)ELISA试剂盒
山羊生长激素(GH)ELISA试剂盒
山羊三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
山羊热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒
山羊醛固酮(ALD)ELISA试剂盒
山羊前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA试剂盒
山羊前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒
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山羊脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒
山羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒
山羊免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA试剂盒
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山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒
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山羊结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒
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山羊甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
山羊甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒
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山羊黄嘌呤氧化酶(XOD)ELISA试剂盒
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山羊骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒
山羊骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒
山羊骨保护素(OPG)ELISA试剂盒
山羊谷胱甘肽还原酶(GSR)ELISA试剂盒
山羊谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)ELISA试剂盒
山羊孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒
山羊睾酮(T)ELISA试剂盒
山羊肝脂酶(HL)ELISA试剂盒
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山羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
山羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
山羊白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒
山羊白介素18(IL-18)ELISA试剂盒
山羊白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒
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山羊阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒
山羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒
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山羊β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒
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山羊转化生长因子β3(TGFβ3)ELISA试剂盒
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山羊胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒