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人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA检测分析试剂盒说明书

点击次数:105 发布时间:2016/12/2 10:19:38
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人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA检测分析试剂盒说明书
参数规格:
产地:国产/进口
规格:48T/96T
保存:2-8℃
检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法
产品特点:运用免疫学技术测定标本的方法,该方法灵敏度高、特异性强、高重复好!
实验方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可提供代测服务。
样本类型:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。每个标本量收集体积=50ul×检测种类。取材前可向销售人员索要人血清剥夺反应相关蛋白elisa试剂盒说明书。
人血清剥夺反应相关蛋白elisa试剂盒样本采集:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在2-4℃备用;如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
常见问题:
1. 问--客户用48T试剂盒,大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条,但是他想做两次,可封板膜只有一张,那如果用完了怎么办?可以用什么别的东西取代吗?
答--可以把封板膜剪掉,用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 问--实验过程中温育是放在哪温育呢?
答--可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行,只要恒定温度为37度。
 
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人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA检测分析试剂盒说明书
操作流程:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
 
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人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA检测分析试剂盒说明书
订购说明:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性; 
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。

原创作者:上海酶远生物科技有限公司

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