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大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA检测试剂盒

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上传时间:2017/5/8 15:39:13

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上 传 者:上海酶远生物科技有限公司

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大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA检测试剂盒 
 参数规格:

检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书.

产品规格:96T/48T。

主要成分:酶标板,试剂,标准品等

经营种类:进口分装和原装、国产

性状:盒装液体

试剂盒保存:2-8℃低温保存。

标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

运输方面:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。

免费代测,从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。

服务承诺:工作规格:48T/96T(仅用于科研,不得用于医学诊断)

保存:2-8℃,避光保存

有效期 :6个月

大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA检测试剂盒 
适用范围:

科研用检测试剂

    近日有位朋友给我们反馈意见说到一点,就是在网站中在线咨询产品elisa试剂盒以及其它产品时,得不到回复,上海酶远生物在这里说明一下,由于我公司产品质量做到*优质,以及各方的优势得到各地朋友们的支持与信赖,我们非常感谢。客户们对我公司产品的热情以至于来不及立即回复,还有许多是在非上班时间咨询的,所以您在线咨询产品时,请留下您的联系方式!

    您也可以拨打我公司业务员的电话,或者本网站中留言(会在半个工作日内给您回复去电话),上海酶远elisa试剂盒感谢大家的支持。

我公司实验室现已拥有多个检测系统:

1.ELISA双抗夹心法检测系统

2.ELISA间接法检测系统

3.ELISA竞争法检测系统

4.ELISA捕获包被法检测系统

5.ABS-ELISA检测系统

ELISA试剂盒"实验操作流程(具体请参照说明书):

① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干

④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值我公司拥有完善的售前、售中、售后服务,以及实验技术指导服务,欢迎您来电咨询上海酶远ELISA试剂盒,第二季度八五折优惠,可为您节省时间提供免费代测服务。

ELISA试剂盒"特点:① 准确度高,灵敏度高,特异性强;② 检测时间短;③ 操作简便;④ 安全可靠,欢迎咨询。

大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA检测试剂盒 
操作注意事项:
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

ELISA标准操作及技术服务的常见问题分析:

.ELISA 标准操作要点

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。

1. 标本的采取和保存

大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。

2.加样

加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。

3.保温

在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经

1-2 小时,产物的生成可达顶峰。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。

4.洗涤

洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是*主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。

洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率在1.5us/cm 之下,洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。

5. 显色和比色

TMB 经HRP 作用后,约40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001,准确性为±1%,重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,使用前先预热仪器15-30 分钟,测读结果更稳定。

测读A 值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD 用492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,次在*适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不 移动ELISA 板的位置,*终测得的A 值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

 

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