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鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA Kit说明书

点击次数:218发布时间:2016/10/6 17:30:06

鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA Kit说明书

更新日期:2017/7/24 21:53:52

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA Kit说明书公司自主研发ELISA试剂盒,低价销售。公司原装ELISA试剂盒、进口ELISA试剂盒、国产ELISA试剂盒,免费代测,实验过程提供完整的技术指导,所有试剂盒均经过充分验证,确保有效性重复性。

优质供应

详细内容

鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA Kit说明书 鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit厂家直销

ELISA试剂盒产品简介:

1.试剂盒保存:-20(较长时间不用时)2-8(频繁使用时)

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

ELISA试剂盒参数规格:

本试剂盒仅供研究使用

 检测范围:欢迎QQ或电话或邮箱索取原版说明书

检测限:欢迎QQ或电话或邮箱索取原版说明书

特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期:6个月

预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

ELISA试剂盒适用范围:

ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,

可概括四个方面:

1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

2、研究抗酶抗体的合成。

3、显现微量的免疫沉淀反应。

4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

ELISA试剂盒说明:

1.试剂盒保存:-20(较长时间不用时)2-8(频繁使用时)

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

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ELISA试剂盒操作步骤:

1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。 每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液11稀释后加 入50ul于反应孔内。

3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物 素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3 次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7)每孔加入底物AB50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

1. 灵敏度:***小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%

ELISA试剂盒标本的稀释原则:

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。*后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml150 pg/ml75 pg/ml37.5 pg/ml18.5 pg/ml9 pg/ml4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

ELISA试剂盒生物素标记抗体的稀释原则:

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

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ELISA试剂盒适用范围:

科研用检测试剂

    近日有位朋友给我们反馈意见说到一点,就是在网站中在线咨询产品elisa试剂盒以及其它产品时,得不到回复,上海酶远生物在这里说明一下,由于我公司产品质量做到*优质,以及各方的优势得到各地朋友们的支持与信赖,我们非常感谢。客户们对我公司产品的热情以至于来不及立即回复,还有许多是在非上班时间咨询的,所以您在线咨询产品时,请留下您的联系方式!

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我公司实验室现已拥有多个检测系统:

1.ELISA双抗夹心法检测系统

2.ELISA间接法检测系统

3.ELISA竞争法检测系统

4.ELISA捕获包被法检测系统

5.ABS-ELISA检测系统

ELISA试剂盒标本要求:

1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 xg离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

ELISA试剂盒样本要求:

  1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

  2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3.样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。

ELISA试剂盒常见问题:

1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.

2、 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。

3、 加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。

4、 反应时间的误差,做大量标本时,孔和*后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器,不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀,是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。

6、 阈值附近实际上是个灰区(grayscale,不能截然分为阴性、阳性,国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次阴*后判为阴,但实际上是否为阴不好说,只有判为可疑,临床上可以让患者过一段时间后再测。

7、 肉眼观察稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的,肉眼目测结果不可靠,应以酶标仪判读为准。

ELISA试剂盒"实验操作流程(具体请参照说明书):

① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干

④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值我公司拥有完善的售前、售中、售后服务,以及实验技术指导服务,欢迎您来电咨询上海酶远ELISA试剂盒,第二季度八五折优惠,可为您节省时间提供免费代测服务。

ELISA试剂盒"特点:① 准确度高,灵敏度高,特异性强;② 检测时间短;③ 操作简便;④ 安全可靠,欢迎咨询。

抗体的酶标记方法及标记效果测定:良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加硼氢化钠(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即得到酶标抗体,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,进行测定后,冷冻干燥或低温保存。

ELISA试剂盒注意事项:

a. 在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。

b.建议新鲜标本收集后尽早检测。1-3天左右检测的样本可储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集标本,请将标本及时分装后放在-20℃或- 70℃条件下保存,避免反复冻融。

1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

3. 一次加样时间控制在5分钟内.

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。

5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请*后乘以稀释倍数。

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

7. 底物请避光保存。

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

本公司elisa试剂盒为现货供应、到货周期短,公司提供免费代测,更好的为您服务!公司提供各种种属、各种系列ELISA检测试剂盒,仅适用于科研,不适用于临床诊断。详情请来电咨询或咨询在线人员。

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ELISA试剂盒”独具特色优势:

1、产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单;

2、发货及时;

3、免费提供ELISA试剂盒待测服务,上海拥有自己的实验和技术团队,公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持,解决实验过程中遇到的问题;

4、免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。   

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ELISA试剂盒价格"冷冻之后要如何使用呢?为其保存后可以使用,但不能反复冻融,因为这是竞争试剂盒,这与激素试剂盒测定激素相似,存储在20 000,预涂板是20 000保存,然后觉得奇怪,为什么这样的操作指南的要求,但正常的测试结果。当然,如果结果是正常的,如病毒检测试剂盒,尤其是正多面体病毒(也就是常说的球状病毒),应放在冰箱冷藏4 000。所以我们建议解冻后运行的时间盒。

    上海酶远诺,您于我公司购买产品后有任何疑问,都可以打电话给我公司业务员,我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间,我们还提供免费代实验,只要你把样品邮寄给我们,我们会在5-7个工作日内完成,并且保证结果。

酶联免疫试剂的准备,按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

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