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南京试剂盒,鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA Kit目前市场价格多少?
点击次数:125发布时间:2017/7/17 18:58:19
更新日期:2017/7/24 21:38:27
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
上海酶远为您实验无忧!联系人:莫经理 手机:17321359962(微信同) QQ:3480225212
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参数规格:
elisa试剂盒产品我司提供免费代测,快速检测一周内出结果。小鼠、人、马、大鼠、猪、牛等ELISA试剂盒产品种类齐全,现货供应,质量可靠,是广大科研学者学习研究的伙伴。
用途:用于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应
存储条件:2-8℃
规格:96T/48T
产品别名:马转化生长因子β2(TGFB2)ELISA定量检测试剂盒,马转化生长因子β2(TGFB2)酶联免疫试剂盒.
96T使用方法:96TELISA检测试剂盒可用作标本90个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本94个,标准对照2个。
48T使用方法:48TELISA检测试剂盒可用作标本46个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本47个,标准对照1个。
工作原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
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试剂盒组成及试剂配制:
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。优势:
1、专业的elisa试剂盒生产企业(Elisa检测试剂盒厂家)
2、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
3、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
4、的优化方案----重复性高,可靠性强
5、购买本公司的ELISA试剂盒,免费代检测,上海地区免费上门取样
6、技术服务要求:专业,规范,高效
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
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ELISA标准操作及技术服务的常见问题分析:
一.ELISA 标准操作要点
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。
1. 标本的采取和保存
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。
2.加样
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。
3.保温
在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经
1-2 小时,产物的生成可达顶峰。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。
4.洗涤
洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是*主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率在1.5us/cm 之下,洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。
5. 显色和比色
TMB 经HRP 作用后,约40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001,准确性为±1%,重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,使用前先预热仪器15-30 分钟,测读结果更稳定。
测读A 值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD 用492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,次在*适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不 移动ELISA 板的位置,*终测得的A 值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
需要而未提供的试剂和器材:
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等