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公司新闻
脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺微板法)--技术资料/价格-赫澎上海生物
点击次数:237发布时间:2021/6/16
脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺微板法)
简介
脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物,在595nm处有大的吸收,在每毫升含DNA20~400微克范围内,光密度与DNA的浓度成正比,在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应的灵敏度。
组成
产品名称规格
100TStorage
试剂(A):DNA标准溶液(200μg/mL)2×1ml-20°C
试剂(B):二苯胺溶液100mlRT 避光
试剂(C): 乙醛溶液1ml4°C
临用试剂B:试剂C=100:1比例混匀即为二苯胺试剂。
说明书一份
操作步骤
(一)DNA标准曲线的制作
取6支试管,编号,按下表加入试剂
编号012345
DNA标准溶液(μl)0100200300400500
蒸馏水(μl)5004003002001000
二苯胺试剂(μl)100010001000100010001000
加毕,摇匀,于60℃恒温水浴中保温1小时,(或于沸水中煮沸15分钟,冷却测0.D595nm值。)以光密度为纵坐标,DNA含量(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线。 (二)样品的测定
取2支试管,各加0.2毫升的待测液(内含DNA应在标准曲线可测范围之内)加蒸馏水稀释至0.5毫升,再加1毫升二苯胺试剂,摇匀,其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的光密度值,从标准曲线上查出相当该光密度DNA的含量,按下式计算出样品中DNA的百分含量。
DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数
注意事项
1、二茉胺法测定DNA含量灵敏度不高,待测样品中DNA含量低于50mg/L即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量,又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,能显著提高测定的灵敏度。
2、样品中含有少量RNA并不影响测定,但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物,故能干扰DNA定理。