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公司新闻
血钾浓度检测试剂盒说明书-可见分光光度法
点击次数:208发布时间:2021/6/30
血钾浓度检测试剂盒说明书
货号:HP560
规格:50T/48S
可见分光光度法
产品组成:
试剂名称规格保存条件
试剂一液体 25 mL×1 瓶4℃保存
试剂二 A液体 5.1mL×1 瓶4℃保存
试剂二 B粉剂×1 瓶4℃保存
试剂三液体 40 mL×1 瓶4℃保存
标准液液体 1 mL×1 支4℃保存
溶液的配制:
1、 试剂一工作液:临用按试剂一(mL):浓硫酸(μL)=5:12 的比例按需配制;
2、 试剂二:临用配制,取试剂二 A 全部加入到试剂二 B 瓶中,混匀;
3、 标准液:2 μmol/mL 钾标准液。临用用蒸馏水稀释 5 倍即 0.4 μmol/mL 的标准溶液。
产品说明:
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡,参与糖及蛋白代谢,保证神经肌肉的正常功能。血清钾高于5.5mmol/L 时称高血钾,高血钾可使神经、肌肉应激性增高,使心肌应激性降低,导致心动过缓,血清钾超过10毫摩尔/升时, 可发生心室纤颤,甚至心脏在舒张期停跳。血清钾低于3.5mmol/L时称低血钾,低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹,引起心肌应激性增高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此,血清钾是常用的生化测定指标。
血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。 通过测定其浊度来测定血清钾含量。
技术指标:
低检出限:0.0095 μmol/mL
线性范围:0.05-1.5 μmol/mL
注意:实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
血清预处理:取 EP 管,依次加入 50μL 血清,450μL 试剂一工作液,充分混匀后室温(25℃左右),8000rpm,离心 10min,取上清液,待测。
二、测定步骤
1.分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 520nm,蒸馏水调零。
2.试剂三置于 25℃水浴中预热 30min 以上。
3.操作表:
加入试剂(μL)空白管测定管标准管
蒸馏水200
标准液200
上清液200
试剂二100100100
混匀后静置 5 min
试剂三700700700
混匀后于 520 nm 立即测定吸光度,分别记 A 空白管、A 测定管、A 标准管。
三、血钾浓度计算
血钾浓度(μmol/mL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×样本稀释倍数
=4×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准液:0.4μmol/mL;样本稀释倍数:(50μL 血清+450μL 试剂一)÷50μL 血清=10。
注意事项:
1、采血后宜尽早进行血清钾测定,时间过长会影响血清钾含量。
2、如果样本吸光值大于1.2,建议将样本用试剂一工作液稀释后进行测定。
实验实例:
1、 取小鼠血清按照测定步骤操作,测得 A 测定管=0.636,A 空白管=0.012,A 标准管=0.397,计算得: 血钾浓度(μmol/mL)=4×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)=6.48 μmol/mL。