企业档案
会员类型：会员
已获得易推广信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广会员：9年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币300万 【已认证】
产品数：17641
参观次数：3825827
公司新闻
M13 噬菌体单链基因组 DNA 快速提取试剂盒
点击次数：216发布时间：2021/7/2
M13 噬菌体单链基因组 DNA 快速提取试剂盒
（离心柱型）
试剂盒内容：
|
试剂盒组成 | (50 次) | (100 次) |
| 结合液 MB | 25 ml | 50 ml |
| 漂洗液 WB | 15 ml | 2×15ml |
| 洗脱缓冲液 EB | 15 ml | 30 ml |
| 吸附柱 AC | 50 个 | 100 个 |
| 收集管（2ml） | 50 个 | 100 个 |
| 说明书 | 1 份 | 1 份 |
选配试剂：
RNaseA（10mg/ml）
储存条件：
该试剂盒置于室温（15–25℃）干燥条件下可保存 12 个月；更长时间的保存可置于 2–8℃。
1. 结合液 MB 低温时可能出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：
M13 和其它的丝状噬菌体载体，在文库构建和为序列测序提供单链 DNA 和引人突变方面十分有用。将适量 M13 丝状噬菌体或者相关噬粒（M13 来源）感染的液体培养物离心，上清中的单链噬菌体 DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物，蛋白等杂质去除，后低盐的洗脱缓冲液将纯净噬菌体单链 DNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
1. 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在 10 分钟内完成。
3. 产量高，典型的产量 800µl M13 丝状噬菌体上清可以提取 3µg 噬菌体单链DNA。
4. 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.7～1.9。可以直接用来测序，一般典型可辨认读长达 650bp。
操作步骤:（实验请先阅读注意事项）
以 800μl 噬菌体感染细菌培养上清提取举例:
提示：次使用请先在 l 漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1. 将 M13 丝状噬菌体或者相关噬粒（M13 来源）感染的液体培养物分装在
1.5 毫升离心管，12,000rpm 离心 5 分钟沉淀菌体。
2. 小心取 800μl 上清转入新的 1.5ml 离心管，加入 400μl 结合液 MB，充分混匀。
如果使用的上清大于或者小于800μl，则结合液MB的用量需要按照比例增加或者减少。
3. 将上述混合物加入一个吸附柱 AC 中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心 15 ，倒掉收集管中的废液。
吸附柱一次多只可以容纳大约700μl混合物，因此需要分次把混合物加到吸附柱内，重复步骤3。
4. 加入 700μl 漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心 30 ，弃废液。
5. 将吸附柱 AC 放回空收集管中，13,000rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
6. 取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 60μl 洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 50℃水浴中预热）， 室温放置 1 分钟， 12,000rpm 离心 1 分钟。如果想得到较多量的 DNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，10,000rpm 离心 1 分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是小体积不应少于40μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
7. DNA 可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。
附录（M13 噬菌体感染细菌培养上清准备过程）:
下面举例说明 M13 噬菌体感染细菌培养上清准备过程，详细的 M13 噬菌体
（或 M13 来源噬粒）培养和上清准备过程请参见『分子克隆』第二版。
1. 37℃ 振摇过夜培养合适的噬菌体宿主菌（如 JM109）。
2. 使用 6％的过夜培养菌接种新鲜的 LB 培养液，37℃振摇培养一个小时。
3. 根据 M13 噬菌体的储存液的浓度（滴度）按照 0.5-1.5%(V/V)的比例加入噬菌体来感染宿主菌。37℃振摇培养 5-6 个小时。
4. 将上面 M13 丝状噬菌体或者相关噬粒（M13 来源）感染的液体培养物分装在 1.5 毫升离心管，12,000rpm 离心 5 分钟沉淀菌体。
5. 可选步骤: 小心取 1 毫升上清转入新的 1.5ml 离心管， 重复步骤 4 离心 5 分钟。
这步有助于去除上清中残留的微量宿主菌 RNA 或者 DNA。
6. 小心取 800μl 上清转入新的 1.5ml 离心管。
7. 现在可以按照操作步骤提取噬菌体单链 DNA 了。
