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公司新闻
脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺微板法)
点击次数：216发布时间：2021/7/19
简介 脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物，在595nm处有大的吸收，在每毫升含DNA20~400微克范围内，光密度与DNA的浓度成正比，在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应的灵敏度。 组成 产品名称 规格 100T Storage 试剂(A)：DNA标准溶液（200μg/mL） 2×1ml -20°C 试剂(B)：二苯胺溶液 100ml RT 避光 试剂(C): 乙醛溶液 1ml 4°C 临用试剂B:试剂C=100：1比例混匀即为二苯胺试剂。 说明书 一份 操作步骤 （一）DNA标准曲线的制作 取6支试管，编号，按下表加入试剂 编号 0 1 2 3 4 5 DNA标准溶液（μl） 0 100 200 300 400 500 蒸馏水（μl） 500 400 300 200 100 0 二苯胺试剂（μl） 1000 1000 1000 1000 1000 1000 加毕，摇匀，于60℃恒温水浴中保温1小时，（或于沸水中煮沸15分钟，冷却测0.D595nm值。）以光密度为纵坐标，DNA含量（ug/ml）为横坐标，绘制标准曲线。 （二）样品的测定 取2支试管，各加0.2毫升的待测液（内含DNA应在标准曲线可测范围之内）加蒸馏水稀释至0.5毫升，再加1毫升二苯胺试剂，摇匀，其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的光密度值，从标准曲线上查出相当该光密度DNA的含量，按下式计算出样品中DNA的百分含量。 DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数 注意事项 1、二茉胺法测定DNA含量灵敏度不高，待测样品中DNA含量低于50mg/L即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量，又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰，能显著提高测定的灵敏度。 2、样品中含有少量RNA并不影响测定，但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物，故能干扰DNA定理。
