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IL- 2 和 IL- 4 的检测实验
点击次数：529 发布时间：2016/9/22 9:44:32
实验步骤 
基 本 方 案 采 用 CTLL- 2 细 胞 检 测 小 鼠 IL - 2 和 IL -4
材 料
较 总 T C G F 和 抗 IL-4 存在时的 T C G F 单位数获得。通过比较抗 IL-4 抗体存在下的
T C G F 活性和两种抗体都存在下的 T C G F 活性的不同来计算 IL-2 活性。
IL-2 活性单位也可用已建立的小鼠 IL-2 标准计算得到。
备 选 方 案 1 采 用 CTLL-2 细 胞 检 测 人 IL -2
附 加 材 料
备 选 方 案 2 采 用 CT.4S 细 胞 检 测 小 鼠 IL -4
一 般 C T L L -2 细 胞 对 IL-2 有较好的应答，但 是 对 IL-4 的应答则时有变化。 C T L L -2 的变异亚系 C T .4S 细 胞 对 IL-4 有较强的应答，对 IL-2 的应答次之，对其他已知的细胞因 子 则 不 应 答（H u -L i ^ W . ， 1989); 因此，使 用 C T .4S 可以高灵敏度地特异性检测 IL-4。 C T .4S 能用来从含有 lOOU/m l 的 IL-2 或其他细胞因子的样品中特异性地定量小 鼠 IL-4。无需使用单克隆抗体来中和 IL- 4 , 但 在确定由 IL- 4 引起的活性时则需要用到 。 C T .4S 细胞对人 IL-4 不应答。 C T .4S 细胞从 D n W .E . Paul 获 得（Laboratoryof
Immunology， National Insitute of Allergy ａnd Infectious Diseases， Bethesda， M D20892)。 C T .4S 细胞的培养见辅助方案 3。
备 选 方 案 3 采 用 CT.h4S 细 胞 检 测 人 IL -4
附 加 材 料
辅 助 方 案 1 白细胞介素或 T 细 胞 生 长 因 子（TCGF) 单位的计算
辅 助 方 案 2 小 鼠 CTLL- 2 细胞的维持
附 加 材 料
重组人 IL-2 (A m g e n )
75c m 2 组 织 培 养 瓶（Corning)
1 . 用 添 加 l U /m l 重 组 人 IL- 2 的 R P M I -I O 完全培养基维持连续增殖的 C T L L -2 细胞。
辅 助 方 案 3 小 鼠 CT.4S 细胞的维持
附 加 材 料
辅 助 方 案 4 小 鼠 CT.h4S 细胞的维持
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
