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淋巴细胞活化过程中肌磷脂周转的分析
点击次数：395 发布时间：2016/9/26 10:19:04
实验步骤
基 本 方 案 1 通 过 道 威 克 斯（DOWEX) 离 子 交 换 层 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸
材料
备 选 方 案 通 过 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸
附加材料
[3 H ] InsP 样 本（见基本方案，步 骤 6) 和标准品
除 气 的 H PLC 级水
2mol/L 的甲酸铵，以磷酸调至 pH3.7
基 本 方 案 2 通过薄层层析方法分析肌醇磷脂
材 料
1 % (m/V ) 草酸钾/2m m ol/LED TA
溶剂： 60 : 20 : 23 : 18 : 12 (V7 V /V7 V 7 V ) /甲醇/丙酮/乙酸/水 ，或 45 :35 : 10 醇/4mol/L NH4OH
细 胞（如肿瘤细胞系、杂交瘤、克隆、凝集素刺激的细胞）
无 磷 酸 盐 的 培 养 基（如 GIBCO/BRL) 含 有 1 0 % (V /V ) 热 灭 活 的 胎 牛 血 清(FCS) ， 用 HBSS 或 TBS (附录 1 ) 透析以去除磷酸盐
原创作者：郑州市国达仪器设备有限公司
