细胞名称：人前列腺癌细胞；Lncap

英文简称：Lncap

背景资料：该细胞由HoroszewiczJS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。

细胞来源：大部分来源ATCC、ECACC、DSMZ等国外细胞库，少数国内建系！

代次：P3

产品规格：T25

细胞数：1x10^6 cells

生长特性：贴壁生长

形态特征：上皮样；梭形

细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

品质保证：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件：89%IMDM+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2

传代方法：建议1:2-1:3 两天换液一次

冻存条件：90%FBS+10%DMSO

二、细胞培养常见问题分析及处理方法

问题1：培养液pH值变化太快

可能原因

（1）CO2张力不对

（2）培养瓶盖拧得太紧

（3）NaHCO3缓冲系统缓冲力不足

（4）培养液中盐浓度不正确

（5）细菌、酵母或真菌污染

建议解决方法

（1）按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度，2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。

（2）松开瓶盖1/4圈。

（3）改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。

（4）在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。

（5）丢弃培养物，或用抗生素除菌。

问题2：培养液出现沉淀，但pH值不变

可能原因

（1）洗涤剂清洗后残留有磷酸盐，将培养基成分沉淀下来

（2）冰冻保存培养液

建议解决方法

（1）用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后灭菌。

（2）将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。

问题3：培养液出现沉淀，同时pH发生变化

可能原因

细菌或真菌污染

建议解决方法

丢弃培养物，或用抗生素除菌。

问题4：培养细胞不贴壁

可能原因

（1）胰蛋白酶消化过度

（2）支原体污染

（3）培养瓶瓶底不干净

（4）培养液pH值过碱（NaHCO3分解）

（5）消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当

（6）细胞老化（如传代前细胞已汇合导致失去贴附性）

（7）接种细胞起始浓度太低或太高

建议解决方法

（1）缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

（2）分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

（3）注意刷洗，或换用一次性塑料培养瓶

（4）使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2（将培养液敞口放入培养箱也可）

（5）重新配置消化液或培养液

（6）启用新的保种细胞

（7）调节*佳接种细胞浓度

三、部分相关细胞如下

人平滑肌细胞；KP-N-YN 89%1640+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人前列腺癌细胞；22Rv1 DMEM(高糖）+10%FBS
小鼠胚胎肝细胞；BNL CL.2 DMEM+10%FBS
人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1 89%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2) 89%EMEM+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人乳腺癌细胞；MDA-MB-468 89%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人盲肠癌细胞；NCI-H747 89%1640+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人乳腺细胞；Hs 606.T 89%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
非洲绿猴肾细胞；VEROC1008(E6) 89%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
乳腺癌细胞；231-luc DMEM(低糖）+10%FBS
人恶性黑色素瘤细胞；SK-MEL-5 89%EMEM+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
子宫内膜癌细胞；MFE-280 89%MEM+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人胰腺正常导管上皮细胞；HPDE6 89%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH 89%MEM+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2
人卵巢癌细胞；RKN 89%F12K+10%FBS+1%双抗；37℃，5% CO2