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探针法Candidatus Mycoplasma haematoparvum实时定量PCR试剂盒
点击次数:66发布时间:2021/11/28 0:39:43
更新日期:2023/9/20 12:12:45
所 在 地:中国大陆
产品型号:Mqt-hpa-100
品牌名称:炎熙生物
优质供应
详细内容
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Candidatus Mycoplasma haematoparvum
货号:Mqt-hpa-20 规格:20个反应
货号:Mqt-hpa-50 规格:50个反应
货号:Mqt-hpa-100 规格:100个反应
储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。
1, 本试剂盒可以特异性检测Candidatus Mycoplasma haematoparvum,不受犬类携带微生物的影响。
2, 本试剂盒灵敏度高,低检出值接近1个基因组。
3, 本试剂盒使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。
4, 本试剂盒带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。
5, 带有dUTP和UDG酶,可降低残留DNA的污染。
嗜血支原体可以感染很多哺乳动物,包括猫、犬、猪、牛、羊等,也包括人类。目已知寄生于犬血中的支原体有两种:犬血支原体(Mycoplasma haemocanis,旧称Haemobartonella canis)和Candidatus Mycoplasma haematoparvum。Candidatus Mycoplasma haematoparvum于2004年在一只行脾切除手术后的犬中次被发现,随后发现其在多个地区广泛分布,阳性率在0-33.3%不等。Candidatus Mycoplasma haematoparvum与Candidatus Mycoplasma haemominutum较为相似,直径为0.3微米,无成串相连现象,很少引起明显的溶血,除非是做了脾切除手术或者发生了免疫抑制。
嗜血支原体无法在体外培养,因此难以开发蛋白类检测方法。常用的检测方法包括显微镜镜检法和PCR法。镜检法灵敏度低,实验误差大,无法区分支原体种类,易受血液中其他物质以及人工涂片方法的干扰,且支原体易从红细胞表面脱落,造成漏检。而PCR法在灵敏度上则有明显的优势,且可以区分支原体种类。定量PCR法与普通PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。
本试剂盒基于16S rRNA基因的保守区域,设计特异性引物和探针,可以准确识别Candidatus Mycoplasma haematoparvum,不受犬类携带微生物的影响。对184个犬血样品的检测获得7个阳性,其中2个为与犬血支原体共感染。
本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。
本试剂盒采用的DNA聚合酶源自端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。