产品名称：润裕生物小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）elisa试剂盒

样    本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等

应    用：科研实验、课题研究

检测方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等

检 测 限：详情咨询客服

用途范围：科研实验、课题研究

产品规格：48T/96T

产品特点：灵敏性高、特异性强、重复性好、精密度准、简便性强、安全性高、经济性省；

产品可提供服务：上海润裕生物所有的科研用elisa试剂盒均可免费代测，全程Elisa实验技术指导。

产品运输：全国各地快递免费，低温运输，用冰袋加泡沫保温盒包装，确保产品运输状态下也处于低温状态。 

上海润裕生物科技有限公司酶联免疫分析检测试剂盒，可以检测Human，Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各种样本，品种齐全，质量保证，免费代测、技术全程支持服务，我公司长期跟各大高校科研实验室保持课题合作，经验丰富，质量稳定！我们所有的产品都是我司直接供货，无中间差价，直接供货，让您以zui经济的实验预算完成您的实验！

润裕生物小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）ELISA试剂盒可以检测的样本如下：

● 液体类标本：人、动物血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

● 培养细胞上清液

● 组织标本

血清样本收集和检测注意事项：

1、血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。

2、血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。

3、一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

润裕生物小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）ELISA试剂盒操作步骤总结如下：

稀释－－加样－－温育－－配液－－洗涤－－加酶－－温育－－洗涤－－显色－－终止－－测定

实验详细操作步骤如下：

1、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2、弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。

3、温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4、每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

5、温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6、依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8、用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

9、具体实验操作步骤以ELISA试剂盒产品说明书为准。