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H I V 的 检 测 与 分 析
点击次数：377 发布时间：2016/9/29 8:47:15
实验步骤 
外 周 血 中 H IV 的 分 离 和 定 量 检 测
基 本 方 案 1 外 周 血 中 H IV 的培养以及通过 TCID 定量来测定其滴度
注 ：所有的培养都在 37°C ，含 5 % 0 3 2 的加湿培养箱中进行。
材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)
来 自 正 常 个 体（H I V -血清反应阴性）及 感 染 个 体（H I V -血清反应阳性）的全血
无菌 P B S ， p H 7.2，或 H B S S
Ficoll-Hypaque 溶液
含 2 ug/p l 植 物 血 凝 素（P H A ) 或 5 % (V A 0 人 IL- 2 的 R P M I -I O 完全培养基
肝 素 钠 真 空 试 管（附 录 3 G )
Sorvall R T -6000 离 心 机 及 H -1000B 转 子（或与其相当的离心机和转子），并配备可以离心培养板的托架
50m l 聚丙烯离心管，无菌
2 4 孔微量滴定板，无 菌（Falcon)
1 . 将 H I V -血清反应阴性供者的全血收集到含有肝素钠（浓度< 2 0 U /ml) 的无菌真空
试管中。血样在室温保存并且在 4 h 内进行处理。每 毫 升 全 血 的 P B M C 预 期 得 率 为 I X l O6 〜 2 X 106 个 细 胞
基 本 方 案 2 感 染 同 种 异 型 T 淋巴母细胞：原 代 分 离 PBMC 中 的 HIV
材 料
原创作者：南京东证教育咨询有限公司
