企业档案
- 会员类型：免费会员
- 工商认证： 【已认证】
- 最后认证时间：
- 法人：
- 注册号：
- 企业类型：经销商
- 注册资金：人民币万
联系我们
联系人：吴菲
热门标签
资料下载
兔白细胞介素酶联免疫分析试剂盒实验原理
详细内容下载：
文件大小：82kb
上传时间：2017/8/29 10:16:26
文件类型：jpg
上 传 者：上海谷研生物科技有限公司
查看次数：286次
下载次数：156次
兔白细胞介素酶联免疫分析试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔白细胞介素 10（IL-10）水平。用纯化的兔白细胞介素 10（IL-10）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加白细胞介素 10（IL-10），再与 HRP标记的白细胞介素 10（IL-10）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 10（IL-10）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔白细胞介素 10（IL-10）浓度。
标本要求兔白细胞介素10（IL-10）酶联免疫分析试剂盒使用说明书
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
兔白细胞介素酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品*终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
温育：操作同 3。
洗涤：操作同 5。
显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项兔白细胞介素10（IL-10）酶联免疫分析试剂盒
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
相关文章
- 2017/11/9人二肽基肽酶-ⅣELISA检测试剂盒实验原理
- 2017/11/7人L-乳酸（L-LA）ELISA试剂盒技术参数
- 2017/11/2转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒使用目的
- 2017/10/31小鼠促黄体生成素（LH）酶联免疫分析试剂盒技术参数
- 2017/10/26布氏杆菌抗体酶联免疫分析试剂盒技术参数
- 2017/10/24人谷氨酸受体1（GluR1）酶联免疫分析试剂盒技术参数
- 2017/10/19大鼠Ⅰ型胶原交联C末端肽酶联免疫分析试剂盒说明书
- 2017/10/17兔超氧化物歧化酶（SOD ）ELISA试剂盒使用说明书
- 2017/10/12小鼠乙肝表面抗原酶联免疫分析试剂盒说明书
- 2017/10/10猪硫酸类肝素（HS）酶联免疫分析试剂盒技术参数
