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细胞的两种染色计数法
点击次数:214 发布时间:2016/12/14
1.荧光染色法
一些荧光染料对死细胞和活细胞也有不同的作用效果,利用荧光显微镜检测细胞活性。如碘化丙啶(PI),被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡细胞的细胞膜,因此活细胞不被染料上色,只有死细胞或凋亡细胞才能被染上红色。吖啶橙(AO)能透过质膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。也可应用AO-EB双染法鉴定细胞死活。
2. 化学染色法
染色计数法是细胞培养中检查细胞死活*常用的方法,直接利用死细胞和活细胞对染料的不同亲和力,检查细胞活性,能在光学显微镜下观察到染色结果。可分为两类:死细胞着色法和活细胞着色法。使死细胞着色的常用染料有台盼蓝、苯胺黑、伊红Y。能使活细胞着色的常用染料有结晶紫、亚甲基蓝、甲苯胺蓝等。其中*常用的是台盼蓝染色法。细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色,而活细胞能阻止染料进入细胞内,故可以鉴别死细胞与活细胞。通过细胞计数可得出细胞的存活率。
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