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技术文章
紫外分光光度法测定蛋白质含量的工作原理
点击次数：619 发布时间：2017/11/2 10:26:26
考马斯亮兰G250与蛋白质结合，在0－1000ug/ml范围内，于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速，结合产物在室温下10分钟内较为稳定，是一种较好的蛋白质定量测定方法。
1. 实验部分
1.1 仪器与试剂：
Labtech UV POWER紫外分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250；
牛血清蛋白；超纯水。
1.2 试液的制备：
牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。
考马斯亮兰G250试剂 称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。
2. 结果与讨论
2.1 校正曲线的绘制
准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml分别加入到6只10ml试管中，然后用超纯水补充到0.1ml，各试管分别加入5ml考马斯亮兰G250试剂，混合均匀后，即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度
1. 实验部分
1.1 仪器与试剂：
Labtech UV POWER紫外分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250；
牛血清蛋白；超纯水。
1.2 试液的制备：
牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。
考马斯亮兰G250试剂 称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。
2. 结果与讨论
2.1 校正曲线的绘制
准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml分别加入到6只10ml试管中，然后用超纯水补充到0.1ml，各试管分别加入5ml考马斯亮兰G250试剂，混合均匀后，即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度
为横坐标，吸光度为纵坐标绘制校正曲线如下图，校正曲线方程为A=0.613556C+0.001008，R=0.9994。
阿托伐醌相关物质A标准品 25mg
阿托伐他汀钙标准品 Atorvastatin Calcium 100mg 344423-98-9
阿托伐他汀钙杂质H对照品标准品 20mg
阿托伐他汀钙杂质I对照品标准品 20mg
阿托伐他汀相关物质A标准品 20mg 433289-83-9
阿托伐他汀相关物质B标准品 20mg 887196-25-0
阿托伐他汀相关物质C标准品 20mg 693793-53-2
阿托伐他汀相关物质D标准品 20mg 148146-51-4
阿托伐他汀相关物质E标准品 10mg 1105067-88-6
原创作者：上海谷研生物科技有限公司
