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计算酶标仪实验数据的方法

点击次数:342 发布时间:2017/10/9
酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的*终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值公式计算:
c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收*多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。
检测值计算
仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。透光值
的计算如下:
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028

OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552

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