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ROX 参考染料200μL使用方法:
一:合成 PCR 用的 1st-strand cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系:RNA RNA 100-500 ng poly(A) mRNA 10-500 ng或专一的 RNA 0.01 pg-500 ng
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或 RNA 模板专一性引物 15-20 pmol
注意:随机引物与 RNA 模板的比例跟 cDNA 合
成的平均长度成反比。
ROX 参考染料200μLRNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20 uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,不需要纯化。
ROX 参考染料200μL产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. *长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
FGFBP2纤维细胞生长因子结合蛋白2抗体
Fascin-3肌动蛋白结合蛋白Fascin3抗体
FEN1结构特异性核酸酶FEN1抗体
FAM61BFAM61B蛋白抗体
FAM63AFAM63A蛋白抗体
FAM3C上皮分泌型FAM3C蛋白抗体
FAM36AFAM36A蛋白抗体
FAM50AFAM50A蛋白抗体
FAM134CFAM134C蛋白抗体
Flightless 1凝溶胶蛋白家族Fli-1抗体
FBRSL1乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白9抗体
FSTL5卵泡抑素相关蛋白5抗体
FOX C2叉头相关转录因子C2抗体
Fbx15Fbx15蛋白抗体
FRMD2FRMD2蛋白抗体
FAM98BFAM98B蛋白抗体
FAM50CFAM50C蛋白抗体
FAM91A1FAM91A1蛋白抗体
FRMD1FRMD1蛋白抗体
FAM126A髓鞘缺陷相关蛋白抗体
FOXB1 + FOXB2叉头蛋白B1+B2抗体
FOXG1叉头蛋白G1抗体
CT112肿瘤/睾丸抗原112抗体
FAM82A1微管动力调节蛋白FAM82A抗体
FAM50BFAM50B蛋白抗体
FMN2形成素2抗体(成蛋白)
Flotillin 1脂阀结构蛋白1抗体
FGF17成纤维细胞生长因子17抗体
FGF23成纤维细胞生长因子23抗体
FGF20成纤维细胞生长因子20抗体
FGF19成纤维细胞生长因子19抗体
FGF22成纤维细胞生长因子22抗体
Fetuin A胎球蛋白A
ROX 参考染料200μLFOXL2叉头蛋白L2抗体
FREAC3叉头相关转录因子3抗体
Ferritin铁蛋白抗体
FLT3LFMS样酪氨酸激酶3配体抗体
FGF9碱性成纤维细胞生长因子9抗体
FES原癌基因酪氨酸蛋白激酶FES抗体
FGF16成纤维细胞生长因子16抗体
FAPA成纤维细胞激活蛋白α抗体
FAP1Fas相关磷酸酶1抗体
Folate Receptor 4叶酸受体4抗体
Frizzled 5Wnt信号受体蛋白抗体
phospho-CD95 (Tyr291)磷酸化载脂蛋白A1抗体
phospho-CD95 (Tyr232) 磷酸化载脂蛋白A1抗体
Phospho-FGFR1 (Tyr307)磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体
FAAH1脂肪酸酰胺水解酶1抗体
FRAS1细胞外基质蛋白FRAS1抗体
Fumarate hydratase富马酸水合酶抗体
FGF21成纤维细胞生长因子21抗体
Fibrillarin核仁纤维蛋白抗体
Ferritin Light Chain铁蛋白轻链抗体
FOXA2肝细胞核因子3抗体
FBP1果糖1,6-二磷酸酯酶抗体
Fructose 6 Phosphate Kinase6磷酸果糖激酶抗体
FBP2肌肉果糖二磷酸酶抗体
Fibrinogen gamma chain纤维蛋白原γ链抗体
Fibrinopeptide B纤维蛋白肽B抗体(血纤肽B)
FGR原癌基因c FGR抗体
FHOD1肢体畸形相关蛋白FHOD1抗体
phospho-FHOD1 (Thr1141)磷酸化肢体畸形相关蛋白FHOD1抗体
Fibulin 2纤连蛋白2抗体
Fibulin 7纤连蛋白7抗体