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T7 体外转录试剂盒50 次使用方法:
一:合成 PCR 用的 1st-strand cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系:RNA RNA 100-500 ng poly(A) mRNA 10-500 ng或专一的 RNA 0.01 pg-500 ng
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或 RNA 模板专一性引物 15-20 pmol
T7 体外转录试剂盒50 次注意:随机引物与 RNA 模板的比例跟 cDNA 合
成的平均长度成反比。
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20 uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,不需要纯化。
T7 体外转录试剂盒50 次产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
本试剂盒提供合成 cDNA 链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. *长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
C10orf8110号染色体开放阅读框81抗体
C19orf4719号染色体开放阅读框47抗体
C19orf5419号染色体开放阅读框54抗体
C1GALT1N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖转移酶1抗体
C19orf1819号染色体开放阅读框18抗体
C19orf2119号染色体开放阅读框21抗体
C19orf2419号染色体开放阅读框24抗体
Collagen alpha-1(II) chain Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体
Cortexin 1皮质素1抗体
C8orf708号染色体开放阅读框70抗体
Carboxypeptidase H胰羧肽酶E抗体
phospho-CK18(Ser60)磷酸化细胞角蛋白18抗体
C20orf11220号染色体开放阅读框112抗体
C10orf8810号染色体开放阅读框88抗体
CRCT1富含半胱氨酸C端蛋白1抗体
CREG2E1A激活基因刺激蛋白2抗体
CWH43细胞壁合成蛋白43抗体
C19orf2919号染色体开放阅读框29抗体
phospho-CDKN1A (Ser130)磷酸化p21蛋白抗体
Phospho-CHK2 (Thr387)磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体
phospho-CaMK2 alpha (Thr305)磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体
Phospho-CDK2 (Thr14)磷酸化周期素依赖性激酶2抗体
phospho-CHEK1 (Ser345)磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
phospho-CDKN1B (Thr198)磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体
phospho-CTNNA1 (Ser641)磷酸化α-连环蛋白抗体
Cyclin E2周期素E2抗体
phospho-CaMK2 beta gamma delta (Thr287)磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2B/D/G抗体
CASC3肿瘤易感候选基因3抗体
phospho-CASC3(Tyr181)磷酸化肿瘤易感候选基因3抗体
phospho-CREB-1(Ser142)磷酸化CREB-1抗体
phospho-CREB-1(Ser121)磷酸化CREB-1抗体
phospho-CDK6 (Tyr24)磷酸化周期素依赖性激酶6抗体
CBL2原癌基因CBL2抗体
T7 体外转录试剂盒50 次phospho-CBL2 (Tyr674)磷酸化原癌基因CBL2抗体
CTNNBIP1β链接素相互作用蛋白1抗体
phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50)磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体
phospho-Beta catenin (Tyr86) 磷酸化β 连环素蛋白抗体
Chloroplast protease叶绿体蛋白酶抗体(植物)
phospho-CDC27 (Ser427)磷酸化后期促进复合蛋白3抗体
Phospho-Cofilin (Tyr140)磷酸化丝切蛋白抗体
phospho-CFL1 (Tyr89)磷酸化丝切蛋白抗体
Phospho-CHK2 (ser33)磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体
Phospho-cdc25A (Ser178)磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
Phospho-cdc25A (Ser293)磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
CDC27后期促进复合蛋白3抗体
phospho-CRK (Ser41)磷酸化CRK抗体
K Cadherin钙粘蛋白6抗体
Cadherin like 23钙粘蛋白23抗体
CDR2小脑变性相关蛋白2抗体
CRK7细胞分裂周期2相关蛋白激酶7抗体
CPa(Clostridium perfringens alpha toxin)A型产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)
phospho-CK18(Ser34)磷酸化细胞角蛋白18抗体
Cytosine deaminase胞嘧啶脱氨酶抗体
C2GNT3C2GNT3蛋白抗体
phospho-c-Jun(Thr239)磷酸化原癌基因c-Jun抗体
phospho-c-Jun(Thr249)磷酸化原癌基因c-Jun抗体
CYFRA21-1 肿瘤标志物CYFRA21-1抗体
phospho-c-Jun(Thr91)磷酸化原癌基因c-Jun抗体
Cyclin A1周期素A1蛋白抗体
CDKN3细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白3抗体
CK42细胞角蛋白42
CD105CD105抗体
Caspase-7半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗体
CD8CD8/CD8-β抗体
CABLES2细胞周期蛋白依赖性激酶CABLES2抗体
Chicken IgY兔抗鸡IgY抗体