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Oligo 快速复性液，10×1mL
点击次数：123发布时间：2017/1/12 9:50:26
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
Oligo 快速复性液，10×1mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
Oligo 快速复性液，10×1mL2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
Oligo 快速复性液，10×1mL产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
犬碱性磷酸酶(ALP)ELISA KitCanine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit
犬甲状腺素(T4)ELISA KitCanine thyroxine,T4 ELISA Kit
犬甲状旁腺激素(PTH)ELISA KitCanine Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
犬基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA KitDog matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
犬基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA KitDog Matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit
犬基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA KitCanine Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
犬基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA KitCanine Matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
犬基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA KitCanine Matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit
犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA KitCanine Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISA KitDog Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit
犬肌酐(Cr)ELISA KitCanine Creatinine,CR ELISA KIT
犬黄体生成素(LH)ELISA KitCanine Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
犬环磷酸腺苷(cAMP)ELISA KitCanine cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
犬环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA KitCanine cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
犬环加氧酶2(COX-2)ELISA KitDog cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA kit
犬红细胞生成素(EPO)ELISA KitDog Erythropoietin,EPO ELISA Kit
犬胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA KitCanine Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit
犬骨形成蛋白-1(BMP-1)ELISA KitCanine bone morphogenetic protein 1,BMP-1 ELISA Kit
犬骨桥素(OPN)ELISA KitCanine Osteopontin ELISA Kit
犬骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA KitCanine bone Alkaline Phosphatase,BALP ELISA Kit
犬骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA KitDog Osteocalcin/bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit
犬骨成型蛋白7(BMP7)ELISA KitDog Bone morphogenetic protein 7,BMP7 ELISA kit
犬骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA KitCanine bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
犬钩端螺旋体IgG(Leptospira)ELISA KitCanine Leptospira IgG ELISA Kit
犬弓形虫循环抗原(TCA)ELISA KitCanine toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA Kit
犬睾酮(T)ELISA KitCanine Testoterone ELISA Kit
犬高迁移率族蛋白A2(HMGA-2)ELISA KitCanine high mobility group AT-hook 2,HMGA2 ELISA Kit
犬高迁移率族蛋白A1(HMGA-1)ELISA KitCanine high mobility group AT-hook 1,HMGA1 ELISA Kit
犬高尔基体膜蛋白1(GOLM1)ELISA KitDog golgi membrane protein 1,GOLM1 ELISA kit
犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA KitCanine heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit
犬肝碱性磷酸酶(L-ALP)ELISA KitCanine Liver Alkaline Phosphatase,L-ALP ELISA Kit
犬甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA KitDog Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
犬干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA KitDog C-X-C motif chemokine 10,CXCL10 ELISA kit
犬泛素蛋白(Ub)ELISA KitDog ubiquitin,Ub ELISA Kit
犬儿茶酚抑素(CAT)ELISA KitDog catestatin,CAT ELISA Kit
犬多肽YY(PYY)ELISA KitDog Peptide YY,PYY ELISA kit
Oligo 快速复性液，10×1mL犬胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA KitCanine cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit
犬催乳素(PRL/LTH)ELISA KitCanine Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
犬促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA KitCanine adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit
犬促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA KitDog corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit
犬促卵泡素(FSH)ELISA KitCanine follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
犬促甲状腺素(TSH)ELISA KitCanine Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit
犬雌激素(E)ELISA KitCanine estrogen,E ELISA Kit
犬雌二醇(E2)ELISA KitCanine Estradiol,E2 ELISA Kit
犬成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA KitCanine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA KitDog asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA kit
犬表面活性蛋白D(SP-D)ELISA KitCanine surfactant protein D,SP-D ELISA Kit
犬表达于SiSo细胞系的受体结合型肿瘤抗原(EBAG9)ELISA KitDog Receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit
犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA KitCanine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KitDog Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
犬白介素7受体(IL7R)ELISA KitDog interleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit
犬白介素6(IL-6)ELISA KitDog Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
犬白介素4(IL-4)ELISA KitDog interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
犬白介素2(IL-2)ELISA KitCanine Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit
犬白介素1α(IL1A)ELISA KitDog Interleukin-1 alpha,IL1A ELISA kit
犬白介素18(IL-18)ELISA KitDog Interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
犬白介素15(IL15)ELISA KitDog Interleukin-15,IL15 ELISA kit
犬白介素11(IL-11)ELISA KitCanine Interleukin 11,IL-11 ELISA kit
