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地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL
点击次数：156发布时间：2017/1/12 10:30:21
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa试剂盒，英文名：MCP-1/CCL2 ELISA Kit
大鼠激活素A(Activin A)ELISA试剂盒，英文名：Activin A ELISA Kit
大鼠活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒，英文名：Activin-A ELISA Kit
大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒，英文名：LN ELISA Kit
大鼠层粘连蛋白(Laminin)ELISA试剂盒，英文名：Laminin ELISA Kit
大鼠层连蛋白(Laminin)ELISA试剂盒，英文名：Laminin ELISA Kit
大鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒，英文名：IL-6 ELISA Kit
大鼠白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒，英文名：IL-4 ELISA Kit
大鼠白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒，英文名：IL-2 ELISA Kit
大鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒，英文名：IL-1β ELISA Kit
大鼠白细胞介素1β(IL-1B)ELISA试剂盒，英文名：IL-1B ELISA Kit
大鼠白细胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA试剂盒，英文名：IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit
大鼠白细胞介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒，英文名：IL-1α ELISA Kit
大鼠白细胞介素18(IL-18)ELISA试剂盒，英文名：IL-18 ELISA Kit
大鼠白细胞介素13(IL-13)ELISA试剂盒，英文名：IL-13 ELISA Kit
大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒，英文名：IL-10 ELISA Kit
大鼠白介素1β(IL-1B)ELISA试剂盒，英文名：IL-1B ELISA Kit
大鼠L选择素(SELL)ELISA试剂盒，英文名：SELL ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子配体1(CXCL1)ELISA试剂盒，英文名：CXCL1 ELISA Kit
大鼠CD80分子(CD80/B7-1)ELISA试剂盒，英文名：CD80/B7-1 ELISA Kit
大鼠左右决定因子1(LEFTY1)ELISA试剂盒，英文名：LEFTY1 ELISA Kit
大鼠组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒，英文名：TGM2 ELISA Kit
大鼠组织型纤溶酶原激活因子(tPA)ELISA试剂盒，英文名：tPA ELISA Kit
大鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒，英文名：TIMP4 ELISA Kit
大鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒，英文名：TIMP3 ELISA Kit
大鼠组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒，英文名：TIMP2 ELISA Kit
大鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA试剂盒，英文名：TIMP1 ELISA Kit
大鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒，英文名：CTSL ELISA Kit
大鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒，英文名：CTSK ELISA Kit
大鼠组织蛋白酶G(CTSG)ELISA试剂盒，英文名：CTSG ELISA Kit
大鼠组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒，英文名：CTSD ELISA Kit
大鼠组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)ELISA试剂盒，英文名：HAT1 ELISA Kit
大鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)ELISA试剂盒，英文名：HDAC1 ELISA Kit
地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL大鼠组蛋白H3(H3)ELISA试剂盒，英文名：H3 ELISA Kit
大鼠组蛋白H2B(H2B)ELISA试剂盒，英文名：H2B ELISA Kit
大鼠组蛋白H2A(H2A)ELISA试剂盒，英文名：H2A ELISA Kit
大鼠组胺H3受体(HRH3)ELISA试剂盒，英文名：HRH3 ELISA Kit
大鼠组氨酸丰富糖蛋白(HRG)ELISA试剂盒，英文名：HRG ELISA Kit
大鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒，英文名：PHB ELISA Kit
大鼠棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA试剂盒，英文名：MPP6 ELISA Kit
大鼠棕榈酰化膜蛋白2(MPP2)ELISA试剂盒，英文名：MPP2 ELISA Kit
大鼠转酮醇酶(TKT)ELISA试剂盒，英文名：TKT ELISA Kit
大鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒，英文名：TFR2 ELISA Kit
大鼠转醛缩酶(TALDO1)ELISA试剂盒，英文名：TALDO1 ELISA Kit
大鼠转录因子20(TCF20)ELISA试剂盒，英文名：TCF20 ELISA Kit
大鼠转录激活因子5(ATF5)ELISA试剂盒，英文名：ATF5 ELISA Kit
