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红霉素溶液 ,100mg/mL10mL
点击次数：158发布时间：2017/1/12 10:30:47
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
红霉素溶液 ,100mg/mL10mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
红霉素溶液 ,100mg/mL10mL5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)elisa试剂盒，英文名：PⅢCP ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)ELISA试剂盒，英文名：HPCⅢ ELISA Kit
大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅲ ELISA Kit
大鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒，英文名：HELIX-Ⅱ ELISA Kit
大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA试剂盒，英文名：CTX-Ⅱ ELISA Kit
大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅱ ELISA Kit
大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒，英文名：PⅠCP ELISA Kit
大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒，英文名：PⅠNP ELISA Kit
大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒，英文名：CTX-Ⅰ ELISA Kit
大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒，英文名：CⅠCP ELISA Kit
大鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)ELISA试剂盒，英文名：PCⅠ ELISA Kit
大鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒，英文名：ⅠCTP ELISA Kit
大鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒，英文名：NTX ELISA Kit
大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒，英文名：CTX-Ⅰ ELISA Kit
大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅰ ELISA Kit
大鼠8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA试剂盒，英文名：8-iso-PGF2a ELISA Kit
大鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒，英文名：8-iso-PG ELISA Kit
大鼠8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒，英文名：8-epi-PGF2α ELISA Kit
大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒，英文名：8-OHdG ELISA Kit
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒，英文名：6-keto-PGF1a ELISA Kit
大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒，英文名：6-K-PG ELISA Kit
大鼠5-羟色胺转运体(5-HTT/SERT)ELISA试剂盒，英文名：5-HTT/SERT ELISA Kit
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒，英文名：5-HT ELISA Kit
大鼠5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒，英文名：5-HIAA ELISA Kit
大鼠5羟二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA试剂盒，英文名：5-HETE ELISA Kit
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒，英文名：5-NT ELISA Kit
大鼠5＇-AMP活化蛋白激酶α-2催化亚基(PRKAA2)ELISA试剂盒，英文名：PRKAA2 ELISA Kit
大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒，英文名：HNE ELISA Kit
大鼠3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)ELISA试剂盒，英文名：SRD5A2 ELISA Kit
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒，英文名：3-NT ELISA Kit
大鼠3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGCS)ELISA试剂盒，英文名：HMGCS ELISA Kit
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA试剂盒，英文名：3-OMD ELISA Kit
红霉素溶液 ,100mg/mL10mL大鼠26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒，英文名：26S PSM ELISA Kit
大鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒，英文名：25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit
大鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒，英文名：25 HVD3 ELISA Kit
大鼠20S蛋白酶体(20SP)ELISA试剂盒，英文名：20SP ELISA Kit
大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒，英文名：2,3-DPG ELISA Kit
大鼠17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒，英文名：17-KS ELISA Kit
大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒，英文名：17-OHP ELISA Kit
大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒，英文名：17-OHCS ELISA Kit
大鼠17-α甲睾酮(17-αMT)ELISA试剂盒，英文名：17-αMT ELISA Kit
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒，英文名：15-LO/LOX ELISA Kit
大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA试剂盒，英文名：12-HETE ELISA Kit
大鼠11β羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)ELISA试剂盒，英文名：11β-HSD1 ELISA Kit
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA试剂盒，英文名：IP3 ELISA Kit
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒，英文名：1,3-βD-Glu ELISA Kit
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA试剂盒，英文名：1,3-βD glucosidase ELISA Kit
大鼠1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA试剂盒，英文名：1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3 ELISA Kit
大鼠1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)ELISA试剂盒，英文名：1,25 DHVD3 ELISA Kit
大鼠质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒，英文名：GDNF ELISA Kit
大鼠纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒，英文名：FN ELISA Kit
大鼠生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒，英文名：GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA试剂盒，英文名：GMCSF/CSF2 ELISA Kit
大鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA试剂盒，英文名：sCD80/B7-1 ELISA Kit
大鼠可溶性CD80(sCD80)ELISA试剂盒，英文名：sCD80 ELISA Kit
大鼠巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒，英文名：GM-CSF ELISA Kit
大鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒，英文名：MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
