产品展示
遗传霉素 (G418) 干粉100mg
点击次数：168发布时间：2017/1/12 10:31:10
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
遗传霉素 (G418) 干粉100mg运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
遗传霉素 (G418) 干粉100mg5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
遗传霉素 (G418) 干粉100mg产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)elisa试剂盒，英文名：Flt3L ELISA Kit
大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒，英文名：Flt3 ELISA Kit
大鼠FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1)ELISA试剂盒，英文名：FRAP1 ELISA Kit
大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒，英文名：E-Selectin/CD62E ELISA Kit
大鼠E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒，英文名：E-Sel ELISA Kit
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒，英文名：E-Cad ELISA Kit
大鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒，英文名：D-LDH ELISA Kit
大鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒，英文名：D2D ELISA Kit
大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒，英文名：DNMT1 ELISA Kit
大鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒，英文名：CNP ELISA Kit
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒，英文名：C-Peptide ELISA Kit
大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒，英文名：CRP ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子受体5(CXCR5)ELISA试剂盒，英文名：CXCR5 ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)ELISA试剂盒，英文名：CXCR4 ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒，英文名：CXCR3 ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒，英文名：CXCL16 ELISA Kit
大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)ELISA试剂盒，英文名：Coro1a/Coro1 ELISA Kit
大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒，英文名：JNK ELISA Kit
大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒，英文名：CD8 ELISA Kit
大鼠CD68分子(CD68)ELISA试剂盒，英文名：CD68 ELISA Kit
大鼠CD63分子(CD63)ELISA试剂盒，英文名：CD63 ELISA Kit
大鼠CD4分子(CD4)ELISA试剂盒，英文名：CD4 ELISA Kit
大鼠CD45分子(CD45)ELISA试剂盒，英文名：CD45 ELISA Kit
大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒，英文名：CD44 ELISA Kit
大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒，英文名：CD3 ELISA Kit
大鼠CD34分子(CD34)ELISA试剂盒，英文名：CD34 ELISA Kit
大鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒，英文名：CD30 ELISA Kit
大鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒，英文名：CD19 ELISA Kit
大鼠CD117分子(CD117)ELISA试剂盒，英文名：CD117 ELISA Kit
大鼠CC趋化因子受体9(CCR9)ELISA试剂盒，英文名：CCR9 ELISA Kit
大鼠C-C趋化因子6(CCL6)ELISA试剂盒，英文名：CCL6 ELISA Kit
大鼠CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒，英文名：C/EBPα ELISA Kit
大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒，英文名：BF ELISA Kit
大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒，英文名：Bcl-2 ELISA Kit
大鼠B细胞活化因子(BAFF)ELISA试剂盒，英文名：BAFF ELISA Kit
大鼠B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子α(NFKBIA)ELISA试剂盒，英文名：NFKBIA ELISA Kit
大鼠B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA试剂盒，英文名：NFKBIE ELISA Kit
大鼠B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒，英文名：BLC-1/CXCL13 ELISA Kit
大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒，英文名：Bid ELISA Kit
大鼠Bcl-2样蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)ELISA试剂盒，英文名：Bcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit
遗传霉素 (G418) 干粉100mg大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒，英文名：BAX ELISA Kit
大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)ELISA试剂盒，英文名：ATP1B4 ELISA Kit
大鼠Apelin(APLN)ELISA试剂盒，英文名：APLN ELISA Kit
大鼠apelin 13(AP13)ELISA试剂盒，英文名：AP13 ELISA Kit
大鼠apelin 12(AP12)ELISA试剂盒，英文名：AP12 ELISA Kit
大鼠Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒，英文名：AGRP ELISA Kit
大鼠ADM2(ADM2)ELISA试剂盒，英文名：ADM2 ELISA Kit
大鼠Ⅵ型胶原(Col Ⅵ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅵ ELISA Kit
大鼠Ⅴ型胶原(Col Ⅴ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅴ ELISA Kit
大鼠Ⅳ型前胶原肽(PⅣNP)ELISA试剂盒，英文名：PⅣNP ELISA Kit
大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅳ ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒，英文名：PⅢNP ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA试剂盒，英文名：PⅢNP ELISA Kit
