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壮观霉素溶液 ,50mg/mL10mL
点击次数：260发布时间：2017/1/12 10:36:38
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
壮观霉素溶液 ,50mg/mL10mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
壮观霉素溶液 ,50mg/mL10mL5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)elisa试剂盒，英文名：EMAb ELISA Kit
大鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒，英文名：pANCA ELISA Kit
大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒，英文名：ACA ELISA Kit
大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒，英文名：PCNA ELISA Kit
大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒，英文名：AT ELISA Kit
大鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒，英文名：PA-IgG/M/A ELISA Kit
大鼠抗血小板抗体IgA(PA-IgA)ELISA试剂盒，英文名：PA-IgA ELISA Kit
大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒，英文名：ACA-IgM ELISA Kit
大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒，英文名：ACA-IgG ELISA Kit
大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒，英文名：ACA-IgA ELISA Kit
大鼠抗心磷脂抗体(ACA)ELISA试剂盒，英文名：ACA ELISA Kit
大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒，英文名：AMA ELISA Kit
大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)ELISA试剂盒，英文名：MAG Ab ELISA Kit
大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒，英文名：dsDNA ELISA Kit
大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒，英文名：ASMA ELISA Kit
大鼠抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒，英文名：ATR ELISA Kit
大鼠抗凝血酶III(AT III)ELISA试剂盒，英文名：AT III ELISA Kit
大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒，英文名：AT-Ⅲ ELISA Kit
大鼠抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒，英文名：AT-Ⅲ ELISA Kit
大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒，英文名：AECA ELISA Kit
大鼠抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒，英文名：ADH/VP/AVP ELISA Kit
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒，英文名：TRACP-5b ELISA Kit
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)ELISA试剂盒，英文名：TRACP 5b ELISA Kit
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)ELISA试剂盒，英文名：TRACP ELISA Kit
大鼠抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒，英文名：AsAb ELISA Kit
大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒，英文名：ATGA/TGAB ELISA Kit
大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒，英文名：TPO-Ab ELISA Kit
壮观霉素溶液 ,50mg/mL10mL大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒，英文名：EMA IgA ELISA Kit
大鼠抗环胍氨酸肽抗体(Anti-CCP-antibody)ELISA试剂盒，英文名：Anti-CCP-antibody ELISA Kit
大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒，英文名：RBC ELISA Kit
大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒，英文名：gp210 ELISA Kit
大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒，英文名：AMA ELISA Kit
大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒，英文名：TRAb ELISA Kit
大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒，英文名：α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
大鼠巨噬细胞移动因子(MIF)ELISA试剂盒，英文名：MIF ELISA Kit
大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒，英文名：MIF ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒，英文名：MIP-5 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒，英文名：MIP-1β/CCL4 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒，英文名：MIP-1α/CCL3 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒，英文名：MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒，英文名：MIP-3α/CCL20 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒，英文名：MIP-2 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒，英文名：AmAC-1 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒，英文名：MDC/CCL22 ELISA Kit
大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒，英文名：M-CSF ELISA Kit
大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)ELISA试剂盒，英文名：AGMAT ELISA Kit
大鼠精氨酸酶1(ARG1)ELISA试剂盒，英文名：ARG1 ELISA Kit
大鼠精氨酸加压素受体1A(AVPR1A)ELISA试剂盒，英文名：AVPR1A ELISA Kit
大鼠精氨酸加压素(AVP)ELISA试剂盒，英文名：AVP ELISA Kit
大鼠精氨酸(Arg)ELISA试剂盒，英文名：Arg ELISA Kit
大鼠紧密连接蛋白1(ZO1)ELISA试剂盒，英文名：ZO1 ELISA Kit
