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衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL
点击次数：205发布时间：2017/1/12 10:38:11
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠神经降压素(NTS)elisa试剂盒，英文名：NTS ELISA Kit
大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒，英文名：ENA-78/CXCL5 ELISA Kit
大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒，英文名：SDH ELISA Kit
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒，英文名：PEDF ELISA Kit
大鼠色氨酸羟化酶(TPH)ELISA试剂盒，英文名：TPH ELISA Kit
大鼠色氨酸5羟化酶2(TPH2)ELISA试剂盒，英文名：TPH2 ELISA Kit
大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒，英文名：T3 ELISA Kit
大鼠三碘甲腺原氨酸(TT3)ELISA试剂盒，英文名：TT3 ELISA Kit
大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒，英文名：COMP ELISA Kit
大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒，英文名：LF/LTF ELISA Kit
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒，英文名：LDH ELISA Kit
大鼠肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPT1)ELISA试剂盒，英文名：CPT1 ELISA Kit
大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒，英文名：CACT ELISA Kit
大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒，英文名：β-CG ELISA Kit
大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒，英文名：CG ELISA Kit
大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒，英文名：PAPP-A ELISA Kit
大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒，英文名：HSF1 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒，英文名：HSP gp96 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)ELISA试剂盒，英文名：Hsp90aa1/Hsp86/Hspca ELISA Kit
大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒，英文名：HSP-90 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒，英文名：HSP-70 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒，英文名：HSP70 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒，英文名：Hsp-60 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒，英文名：HSP47 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒，英文名：HSP-40 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒，英文名：HSP-27 ELISA Kit
大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒，英文名：HSP-20 ELISA Kit
大鼠缺氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒，英文名：HIF-1α ELISA Kit
大鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒，英文名：IMA ELISA Kit
大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒，英文名：ALD ELISA Kit
大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒，英文名：i-PTH ELISA Kit
大鼠去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒，英文名：dGHRL ELISA Kit
大鼠去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒，英文名：NE ELISA Kit
大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒，英文名：NA ELISA Kit
大鼠趋化因子9(CXCL9)ELISA试剂盒，英文名：CXCL9 ELISA Kit
大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒，英文名：fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit
大鼠趋化因子(FK)ELISA试剂盒，英文名：FK ELISA Kit
大鼠清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒，英文名：SAP ELISA Kit
大鼠清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒，英文名：SRB/CD36 ELISA Kit
大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒，英文名：Hyp ELISA Kit
大鼠羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)ELISA试剂盒，英文名：HMG-CoAR ELISA Kit
大鼠羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)ELISA试剂盒，英文名：HMG-CoA ELISA Kit
大鼠强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒，英文名：Dyn ELISA Kit
衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL大鼠潜伏转化生长因子结合蛋白1(LTBP1)ELISA试剂盒，英文名：LTBP1 ELISA Kit
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒，英文名：Pro-ANP ELISA Kit
大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒，英文名：PSA ELISA Kit
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒，英文名：PAP ELISA Kit
大鼠前列腺素H2(PGH2)ELISA试剂盒，英文名：PGH2 ELISA Kit
大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)ELISA试剂盒，英文名：PGFS ELISA Kit
大鼠前列腺素F2α受体(PTGFR)ELISA试剂盒，英文名：PTGFR ELISA Kit
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒，英文名：PGF2α ELISA Kit
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒，英文名：PGF ELISA Kit
大鼠前列腺素E代谢物(PGEM)ELISA试剂盒，英文名：PGEM ELISA Kit
大鼠前列腺素E2合成酶(PGES)ELISA试剂盒，英文名：PGES ELISA Kit
大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒，英文名：PGE2 ELISA Kit
