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盐酸万古霉素溶液 ,50mg/mL10mL
点击次数：415发布时间：2017/1/12 10:39:01
更新日期：2022/8/17 11:57:28
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：克隆及表达
优质供应
详细内容
盐酸万古霉素溶液 ,50mg/mL10mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需盐酸万古霉素溶液 ,50mg/mL10mL根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
盐酸万古霉素溶液 ,50mg/mL10mL产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠晚期氧化蛋白产物(AOPP)elisa试剂盒，英文名：AOPP ELISA Kit
大鼠晚期糖基化终末产物受体(RAGE)ELISA试剂盒，英文名：RAGE ELISA Kit
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒，英文名：AGEs ELISA Kit
大鼠晚期糖基化终末产物(AGE)ELISA试剂盒，英文名：AGE ELISA Kit
大鼠晚期糖基化端产物特异受体(AGER)ELISA试剂盒，英文名：AGER ELISA Kit
大鼠脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒，英文名：DPD ELISA Kit
大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒，英文名：DPD ELISA Kit
大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒，英文名：DHEA-S ELISA Kit
大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒，英文名：DHEA-S7 ELISA Kit
大鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒，英文名：DHEA ELISA Kit
大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA试剂盒，英文名：MT/MLT ELISA Kit
大鼠褪黑素(MT)ELISA试剂盒，英文名：MT ELISA Kit
大鼠突触体素/突触素(Syp/SYN)ELISA试剂盒，英文名：Syp/SYN ELISA Kit
大鼠突触蛋白1(Syn1)ELISA试剂盒，英文名：Syn1 ELISA Kit
大鼠透明质酸酶1(HYAL1)ELISA试剂盒，英文名：HYAL1 ELISA Kit
大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒，英文名：HABP ELISA Kit
大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒，英文名：HA ELISA Kit
大鼠铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒，英文名：CP ELISA Kit
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒，英文名：Hcy ELISA Kit
大鼠铁蛋白(Ferritin)ELISA试剂盒，英文名：Ferritin ELISA Kit
大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒，英文名：FE ELISA Kit
大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒，英文名：AST ELISA Kit
大鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒，英文名：AST ELISA Kit
大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒，英文名：GP-MM ELISA Kit
大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒，英文名：GP-II ELISA Kit
大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒，英文名：GP-BB ELISA Kit
大鼠糖原磷酸化酶(GP)ELISA试剂盒，英文名：GP ELISA Kit
大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)ELISA试剂盒，英文名：GSK3A ELISA Kit
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒，英文名：GSK ELISA Kit
大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒，英文名：CDT ELISA Kit
大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒，英文名：GR ELISA Kit
大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒，英文名：GR-β ELISA Kit
大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒，英文名：GR-α ELISA Kit
盐酸万古霉素溶液 ,50mg/mL10mL大鼠糖类抗原199(CA199)ELISA试剂盒，英文名：CA199 ELISA Kit
大鼠糖类抗原125(CA125)ELISA试剂盒，英文名：CA125 ELISA Kit
大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒，英文名：GHbA1c ELISA Kit
大鼠糖化血红蛋白(GHbA1C)ELISA试剂盒，英文名：GHbA1C ELISA Kit
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒，英文名：gp130 ELISA Kit
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒，英文名：CA-2 ELISA Kit
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒，英文名：CA ELISA Kit
大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒，英文名：PLGF ELISA Kit
大鼠羧甲基赖氨酸(CML)ELISA试剂盒，英文名：CML ELISA Kit
大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA试剂盒，英文名：ucOC ELISA Kit
大鼠髓样细胞触发性受体2(TREM2)ELISA试剂盒，英文名：TREM2 ELISA Kit
大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒，英文名：TREM-1 ELISA Kit
大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)ELISA试剂盒，英文名：MAG ELISA Kit
大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP antibody)ELISA试剂盒，英文名：MBP antibody ELISA Kit
大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒，英文名：MBP ELISA Kit
大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒，英文名：MBP ELISA Kit
大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒，英文名：MPO-ANCA IgG ELISA Kit
