SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)elisa试剂盒Guinea pig major histocompatibility complex,MHC/GPLA ELISA Kit96T/48T

豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Guinea Pig Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒Guinea Pig calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit96T/48T

豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒Guinea Pig plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit96T/48T

豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 Guinea Pig 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒Guinea Pig Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T

豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒guinea pig Histamine,HIS ELISA Kit96T/48T

豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 96T/48T

豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit96T/48T

豚鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒 Guinea pig Growth hormone,GH ELISA Kit96T/48T

豚鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒guinea pig Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit96T/48T

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒guinea pig Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 guinea pig Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit96T/48T

豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒guinea pig tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit96T/48T

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒guinea pig matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit96T/48T

豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit 96T/48T

豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit96T/48T

豚鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 guinea pig telomerase,TE ELISA Kit96T/48T

豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒guinea pig follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit96T/48T

豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒guinea pig intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit96T/48T

豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 96T/48T

豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 96T/48T

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit96T/48T

豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒 Guinea Pig lipid peroxlde,LPO ELISA Kit 96T/48T

豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 96T/48T

豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒 Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit 96T/48T

豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T

植物磷脂酰甘油(PG)ELISA试剂盒 Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA Kit96T/48T

植物玉米索核苷（ZR ）ELISA试剂盒Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit96T/48T

植物赤霉素（GA） ELISA试剂盒Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit96T/48T

植物血凝素（PHA ）ELISA试剂盒phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit96T/48T

植物生长激素（GH ）ELISA试剂盒 Plant growth hormone,GH ELISA Kit 96T/48T

植物凝脂酸（PA ）ELISA试剂盒 Plant phosphatidic acid,PA ELISA Kit 96T/48T

植物吲哚乙酸（IAA） ELISA试剂盒Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit96T/48T

SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA试剂盒 Wheat germ agglutinin,WGA ELISA Kit96T/48T

荆豆凝集素(UEA)ELISA试剂盒 Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA Kit96T/48T

槐凝集素(SJA)ELISA试剂盒 Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA Kit96T/48T

花生凝集素(PNA)ELISA试剂盒 Peanut agglutinin,PNA ELISA Kit96T/48T

大豆凝集素(SBA)ELISA试剂盒 Soybean agglutinin,SBA ELISA Kit96T/48T

菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒 Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA Kit96T/48T

扁豆凝集素(LCA)ELISA试剂盒 Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA Kit96T/48T

蓖麻凝集素(RCA)ELISA试剂盒 Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA Kit96T/48T

豌豆凝集素(PSA)ELISA试剂盒 Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit96T/48T

双花扁豆凝集素(DBA)ELISA试剂盒 Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA Kit96T/48T

植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒 Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 96T/48T

植物激素脱落酸（ABA ）ELISA试剂盒Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA Kit96T/48T

植物维生素K1(VK1)ELISA试剂盒 Plant Vitamin K1,VK1 ELISA Kit 96T/48T

植物维生素B12(VB12)ELISA试剂盒 Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 96T/48T

植物维生素A(VA)ELISA试剂盒 Plant Vitamin A,VA ELISA Kit 96T/48T

植物维生素E(VE)ELISA试剂盒 Plant Vitamin E,VE EELISA Kit 96T/48T

植物维生素D2(VD2)ELISA试剂盒 Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 96T/48T

植物维生素D3(VD3)ELISA试剂盒 Plant Vitamin D3,VD3 ELISA Kit 96T/48T

植物维生素D(VD)ELISA试剂盒 Plant Vitamin D,VD ELISA Kit 96T/48T

植物维生素B6(VB6)ELISA试剂盒 Plant Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 96T/48T

植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T

植物维生素C(VC)ELISA试剂盒 Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 96T/48T